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原位末端凋亡法(Tunel)實驗技術服務
TUNEL細胞凋亡檢測 (TUNEL Apoptosis Assay) 是一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。
服務類別:分子與細胞總訪問:364
最后更新:2021-9-1半年訪問:1
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  • 服務介紹
  • 公司簡介
★服務描述:
TUNEL細胞凋亡檢測 (TUNEL Apoptosis Assay) 是一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細胞或組織樣品,經過生物素標記和后續的DAB顯色等步驟,即可在普通光學顯微鏡下觀察到凋亡細胞。細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現 180-200bp的DNA ladder。
基因組DNA斷裂時,暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標記的dUTP(Biotin-dUTP),隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結合,最后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞,從而可以通過普通光學顯微鏡檢測到凋亡的細胞。


★服務內容:
  1. 組織切片/細胞爬片
  2. 常規TUNEL檢測
  3. 熒光TUNEL試劑盒檢測
  4. 數據整理及結果分析
  5. 根據客戶需要對細胞核進行熒光染色


★需要提供的信息:
  1. 懸浮生長培養細胞的甩片或涂片
  2. 貼壁生長的培養細胞 
  3. 冰凍切片 
  4. 常規石蠟切片 
取材保持組織新鮮(組織塊以小于2cm×1.5cm×0.3cm為宜),立即放入固定液(固定液用10%福爾馬林液或4%福爾馬林緩沖液,體積為組織塊的10倍以上)中,避免干燥;對于有血跡的樣本,可用PBS液或生理鹽水沖洗后直接放入固定液中;經固定后的樣本必須在48小時內處理。


★服務價格:



★服務周期:
15~20天 


★提供結果:
  1. 成像圖片(或按客戶需要排列圖片,達到可直接發表水平)
  2. 實驗詳細流程
  3. 原始數據
  4. 標記后(處理后)的樣本



★服務說明:
  1. 由客戶提供熒光TUNEL檢測試劑盒
  2. 本公司保證數據的客觀性、準確性,但不保證與客戶預期吻合
  3. 結果分析時注意:在壞死的晚期階段或在高度增殖/代謝的組織細胞中可產生大量DNA片斷,從而引起假陽性結果;而有些類型的凋亡性細胞死亡缺乏DNA斷裂或DNA裂解不完全,以及細胞外的矩陣成分阻止TdT進入胞內反應,進而產生假陰性結果。
  4. 初次檢測細胞凋亡,最好設置陽性對照片。血細胞含量高的組織,盡可能延長過氧化氫的滅活時間。蘇木素的復染時間需要摸索。
  5. 每片所加試劑可調整,一般30~100 ul不等,但也要防止液體揮發而干片,且反應均在放置濕盒內。


★其他服務項目:



★項目一般流程:



聯系人:向經理
電話:18611436926
QQ:1934850071
地址:北京市海淀區學院路35號院世寧大廈14層1405室
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