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凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA-electrophoreticmobilityshiftassay)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結 合序列相互作用的技術
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凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA-electrophoreticmobilityshiftassay)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結 合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,目前已用于研究RNA結合蛋白和RNA序列的相互作用,已經成為轉錄 因子研究的經典方法。
當蛋白質與末端標記的核酸探針結合后,SDS–PAGE電泳時這種復合物比無蛋白結合的探針在凝膠中泳動的速度慢,即表現為相對滯后,用于檢測DNA結合 蛋白、RNA結合蛋白,并可通過加入特異性的抗體(supershift)來檢測特定的蛋白質,也可進行未知蛋白的鑒定。 | ![]() |
應用方向:
目前,EMSA已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,已經成為轉錄因子研究的經典方法。
1、用于研究特定的轉錄因子以及轉錄因子所結合的順勢作用元件。
2、用于研究與蛋白質相結合的DNA的序列的特異性。
3、評估突變對探針DNA與結合蛋白相互作用的影響。
說明:
1、細胞核蛋白或純化的轉錄因子(部分實驗亦可使用重組表達的蛋白),依據實驗設計至少提供50ul,濃度大于0.5mg/ml。 |
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曲經理
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