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無需外部注射DT,DTA小鼠精準驅動細胞條件性剔除的介紹

瀏覽次數:719 發布日期:2025-4-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
在上一期內容中,我們為大家介紹了DTR小鼠模型,它通過注射白喉毒素(DT)來實現條件性細胞剔除。如果還有朋友對這一模型不太了解,可以點擊鏈接查看詳細介紹:細胞條件性剔除:DTR小鼠助力細胞功能研究

不過,白喉毒素(DT)是一種管制藥物,獲取難度較大,并且在使用過程中,劑量的不同會導致效果出現較大差異。那么,除了DTR小鼠模型,還有其他方案嗎?本期內容,我們將為大家詳細介紹DTA小鼠模型。

DTR模型需要注射白喉毒素(DT)來激活,通過DTR受體介導的細胞死亡,而DTA(DT subunit alpha gene)則是直接表達毒素亞基A,導致細胞自主性死亡,無需外部注射DT。通過將表達DTA的flox小鼠與Cre小鼠進行配繁,實現在特定細胞中直接表達DTA直接介導細胞的特異性剔除。

研究案例一
本研究中,作者將Aldh1L1-DTA小鼠與Pax3-Cre或Oliga2-Cre小鼠配繁后去除eGFP和STOP序列,表達DTA,實現區域星形膠質細胞特異性剔除,結果發現,區域星形膠質細胞耗竭導致神經元異常。


Fig.1 Regional astrocyte depletion results in neuronal abnormalities[1]

研究案例二
本研究中,作者為驗證肝細胞對于維持造血干細胞和祖細胞(HSPC)中的基因組穩定性至關重要,構建了Alb-Cre和ROSA26-LSL-DTA小鼠。通過將兩者進行交配,獲得了Alb-Cre+/-iDTA+/-小鼠,結果表明,這些小鼠的肝細胞數量在E16.5時減少了約 50%,HSPC(Kit+)的數量減少了30%[2]


Fig.2 HSPCs lack hepatocyte refuge in the early fetal liver[2]

上述方法只能實現特定細胞的剔除,而無法實現特定時間的細胞剔除。如果想要在某個特定階段研究細胞的功能,我們可以利用CreERT系統或者Tet-on/off系統實現。

研究案例三
本研究中,作者將p21-Cre小鼠(需他莫昔芬誘導表達Cre,P小鼠)與Rosa-LSL-DTA小鼠交配獲得p21-Cre/+;DTA/+小鼠(P/D小鼠)。P和P/D小鼠從20個月大開始每月接受兩次他莫昔芬劑量注射(PD小鼠注射他莫昔芬后可實現p21高表達細胞特異性剔除)。結果發現,PD小鼠中位壽命延長了79天,中位生存期提升27%,死亡風險降低至57%;小鼠的最大壽命也增加了約8.1%[3]
 


Fig.3 Intermittent clearance of p21high cells extends both median and maximum lifespans in mice[3]


好啦,聽了這么多,大家是不是疑惑在做細胞條件性剔除的時候應該選擇DTR小鼠還是DTA小鼠呢?從查閱到的文獻來看,目前使用DTR小鼠的更多。小編在這里也總結了兩者的優缺點,大家可以根據自己的需求結合文獻進行選擇。


南模生物DTA小鼠
南模生物開發了一系列DTA小鼠模型,可用于不同細胞類型的選擇性剔除。部分模型見下表:

除上述品系外,南模生物在基因修飾小鼠模型的開發方面具有豐富的經驗和技術平臺,可根據客戶需求定制各種類型的DTA小鼠模型。

若您有相關需求,歡迎撥打400-728-0660熱線,或通過南模生物微信公眾號在線咨詢。我們的專業團隊將竭誠為您服務!

Reference:
[1] Tsai HH, Li H, Fuentealba LC, et al. Regional astrocyte allocation regulates CNS synaptogenesis and repair. Science. 2012;337(6092):358-362. doi:10.1126/science.1222381
[2] Guo XL, Wang YD, Liu YJ, et al. Fetal hepatocytes protect the HSPC genome via fetuin-A [published correction appears in Nature. 2025 Mar;639(8053):E3. doi: 10.1038/s41586-025-08714-8.]. Nature. 2025;637(8045):402-411. doi:10.1038/s41586-024-08307-x
[3] Wang B, Wang L, Gasek NS, et al. Intermittent clearance of p21-highly-expressing cells extends lifespan and confers sustained benefits to health and physical function. Cell Metab. 2024;36(8):1795-1805.e6. doi:10.1016/j.cmet.2024.07.006

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