AOPI熒光染色法：細胞活率分析的標準化解決方案
關于AOPI熒光染色法
AOPI熒光染色原理
AOPI試劑由AO（Acridine Orange，吖啶橙）和PI（Propidium iodide，碘化丙啶）組成。其中，AO是一種異染性熒光陽離子染料，可滲透細胞膜，并嵌入所有細胞（活細胞和死細胞）的細胞核，檢測到綠色熒光。PI不能通過完整的細胞膜，只能進入死細胞的細胞膜，并嵌入死細胞的細胞核，檢測到紅色熒光。當AO、PI試劑均存在于細胞中，在合適的染料配比下，染料間會發生熒光共振能量轉移，致活細胞被激發出綠色熒光，死細胞被激發出紅色熒光。
使用CytScop系列智能細胞計數儀經AOPI染色后獲得的代表性細胞圖像
傳統操作步驟
AOPI熒光染色法標準化的基石：微流控+AI模型
CytScop®Pro智能細胞計數儀通過微流控芯片全自動染色混勻、AI算法自動識別分析樣品，無需手動移液、染色、混勻、上樣、細胞活率分析等操作，實現全自動標準化細胞樣品活率分析，消除主觀因素對檢測結果的影響。檢測完成一個樣品后，自動清洗，確保樣品之間的檢測一致性，提高結果的可靠性和重復性。
自動染色&混勻：AOPI染料集成于芯片流道，細胞懸液注入后自動溶解混合，消除人工配液誤差；專利的微米級通道設計使得樣品混勻過程保持樣品的完整性；使得儀器液路系統更加精簡，用戶在日常操作中所需給設備清潔和維護工作量大幅降低。
雙熒光+明場大視野光學系統成像
CytScop的光學專利技術利用細胞與其周圍水介質之間的微小折射率差異來增強細胞與其類似的透明溶液中產生高效的對比度。這種技術方法在明場模式下，能夠突出細胞的外觀形態和局部特征均能產生明顯的差異，具有非常好的立體感和極佳的細節表現能力。系統在暗場熒光下，系統能夠收集更多的熒光信號，從而增強不同波長的熒光特異性。
CytScop®的AI模型能夠更科學地識別細胞凋亡/團簇團聚等復雜情況；模型運行時，不再需要人為設置各種參數閾值如直徑、亮度、圓度、系數等，對不同的細胞類型/生物工藝具有良好的可拓展性與更準確的泛化能力，使得分析結果更加準確。
綜上所述，基于AOPI熒光染色法并結合CytScop®細胞計數儀的自動化分析，為細胞治療產品的細胞活率分析提供了一個高精度、標準化的解決方案。通過完全自動化操作生成的客觀、可量化、可追溯數據，為GMP合規性提供了堅實保障；其強大的細胞類型兼容性，使其能有效適應不同來源、形態各異的復雜細胞樣本，覆蓋從中間過程控制及工藝評估等關鍵工藝步驟；同時，微流控技術的創新應用顯著降低的樣本消耗量，使其對自體細胞等珍貴的治療性細胞樣本尤為友好，為細胞產品研發和生產提供更加準確、高效、便捷的細胞計數和分析解決方案。
