關(guān)于AOPI熒光染色法
AOPI熒光染色原理
AOPI試劑由AO(Acridine Orange,吖啶橙)和PI(Propidium iodide,碘化丙啶)組成。其中,AO是一種異染性熒光陽(yáng)離子染料,可滲透細(xì)胞膜,并嵌入所有細(xì)胞(活細(xì)胞和死細(xì)胞)的細(xì)胞核,檢測(cè)到綠色熒光。PI不能通過(guò)完整的細(xì)胞膜,只能進(jìn)入死細(xì)胞的細(xì)胞膜,并嵌入死細(xì)胞的細(xì)胞核,檢測(cè)到紅色熒光。當(dāng)AO、PI試劑均存在于細(xì)胞中,在合適的染料配比下,染料間會(huì)發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移,致活細(xì)胞被激發(fā)出綠色熒光,死細(xì)胞被激發(fā)出紅色熒光。
使用CytScop系列智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)AOPI染色后獲得的代表性細(xì)胞圖像
AOPI熒光染色法標(biāo)準(zhǔn)化的基石:微流控+AI模型
CytScop®Pro智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過(guò)微流控芯片全自動(dòng)染色混勻、AI算法自動(dòng)識(shí)別分析樣品,無(wú)需手動(dòng)移液、染色、混勻、上樣、細(xì)胞活率分析等操作,實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞樣品活率分析,消除主觀因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。檢測(cè)完成一個(gè)樣品后,自動(dòng)清洗,確保樣品之間的檢測(cè)一致性,提高結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。
CytScop®的AI模型能夠更科學(xué)地識(shí)別細(xì)胞凋亡/團(tuán)簇團(tuán)聚等復(fù)雜情況;模型運(yùn)行時(shí),不再需要人為設(shè)置各種參數(shù)閾值如直徑、亮度、圓度、系數(shù)等,對(duì)不同的細(xì)胞類型/生物工藝具有良好的可拓展性與更準(zhǔn)確的泛化能力,使得分析結(jié)果更加準(zhǔn)確。
綜上所述,基于AOPI熒光染色法并結(jié)合CytScop®細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的自動(dòng)化分析,為細(xì)胞治療產(chǎn)品的細(xì)胞活率分析提供了一個(gè)高精度、標(biāo)準(zhǔn)化的解決方案。通過(guò)完全自動(dòng)化操作生成的客觀、可量化、可追溯數(shù)據(jù),為GMP合規(guī)性提供了堅(jiān)實(shí)保障;其強(qiáng)大的細(xì)胞類型兼容性,使其能有效適應(yīng)不同來(lái)源、形態(tài)各異的復(fù)雜細(xì)胞樣本,覆蓋從中間過(guò)程控制及工藝評(píng)估等關(guān)鍵工藝步驟;同時(shí),微流控技術(shù)的創(chuàng)新應(yīng)用顯著降低的樣本消耗量,使其對(duì)自體細(xì)胞等珍貴的治療性細(xì)胞樣本尤為友好,為細(xì)胞產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)提供更加準(zhǔn)確、高效、便捷的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析解決方案。