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如何修煉成流式高手 - 樣本檢測

瀏覽次數(shù):2880 發(fā)布日期:2020-10-29  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

     

新建自動補(bǔ)償實驗

問題來了,為什么調(diào)電壓就的重新補(bǔ)償?

熒光補(bǔ)償?shù)哪康木褪窍裏晒庖缏⿲?shù)據(jù)分析的復(fù)雜性,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。從下面公式(以FITC溢漏到PE通道為例)可以看出,熒光溢漏(補(bǔ)償)的大小和平均熒光強(qiáng)度有直接關(guān)系,電壓gain值的大小又影響著MFI的大小。故電壓Gain的大小會直接影響熒光補(bǔ)償值的大小。

640 (2).png

Tips:補(bǔ)償調(diào)節(jié)時要注意:使用未染色的細(xì)胞做PMT的電壓設(shè)置;不要使用未染色的補(bǔ)償微球設(shè)置電壓

   

CytoFLEX 支持在線及脫機(jī)調(diào)補(bǔ)償。多色應(yīng)用中,增加新的單染管到先前保存的補(bǔ)償實驗中,輕松實現(xiàn)全新補(bǔ)償矩陣的建立。并支持增益設(shè)置改變后,補(bǔ)償值自動進(jìn)行修改,因此無需手動調(diào)整補(bǔ)償。

在線根據(jù)增益轉(zhuǎn)換補(bǔ)償矩陣

QQ截圖20201026114754.png

從補(bǔ)償庫導(dǎo)入補(bǔ)償值-工作流程:

640 (6).png
 

從補(bǔ)償文件導(dǎo)入補(bǔ)償值:

從補(bǔ)充文件導(dǎo)入補(bǔ)償值.gif

檢測線性與補(bǔ)償
 

CytoFLEX平臺實測熒光強(qiáng)度與對應(yīng)檢測器增益設(shè)定值呈線性關(guān)系。調(diào)整增益時,軟件自動實時重新計算溢出值。半導(dǎo)體工藝可高度重現(xiàn),因此CytoFLEX平臺的實測熒光強(qiáng)度與對應(yīng)檢測器的增益設(shè)置成線性關(guān)系。而基于PMT檢測的非線性意味著需要根據(jù)經(jīng)驗來確定電壓。

QQ截圖20201029120020.png

 

 



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