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C57/BL6 小鼠中的競爭性骨髓移植實驗簡述

瀏覽次數(shù):12053 發(fā)布日期:2019-3-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
造血干細(xì)胞 (HSC) 能夠分化形成血液系統(tǒng)的全部細(xì)胞,是維持血液系統(tǒng)所必需的細(xì)胞。造血干細(xì)胞是一種多能干細(xì)胞,具有自我更新的能力,并能夠通過層次過程生成各種血細(xì)胞系統(tǒng)的中期細(xì)胞,從而再生成機(jī)體血細(xì)胞。

為研究干細(xì)胞龕,研究人員必須能夠確定在受控條件下細(xì)胞群生成成體細(xì)胞系統(tǒng)的能力。實驗中采用的典型策略是將富含 HSC 的骨髓移植到受體小鼠血液系統(tǒng)之中,而受體小鼠的血液系統(tǒng)經(jīng)亞致死劑量照射后人為清除。在這些小鼠中,成體血細(xì)胞以及干細(xì)胞、前體細(xì)胞均將在 照射 2 周后死亡。經(jīng)過移植的細(xì)胞可以分化新的血液系統(tǒng),從而解救小鼠。HSC 可基于其短期 (ST- HSC)、長期 (LT-HSC) 以及中期 (IT- HSC) 重建能力實現(xiàn)再次分裂 。在大多數(shù)報告中,研究人員確定 LT-HSC 的方式是:在移植術(shù)后 16-44 周的不同時間點,對其生成循環(huán)單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的能力進(jìn)行測定。對移植后細(xì)胞進(jìn)行的第一次競爭性分析應(yīng)在移植術(shù)后 4-6 周予以完成。

在移植研究中,通常采用野生型近交 C57/BL6 小鼠,但前提是:這些小鼠攜帶Ptprcb 白細(xì)胞標(biāo)記
(CD45.2/Ly5.2) 等位基因。Sloan Kettering 研究所 通過回交 SJL 小鼠與野生型 C57/BL6 小鼠的方式,培養(yǎng)出了一種被稱為 C57BL/6-Ly5.1 的同類品系小鼠。這些小鼠攜帶 Ptprcb 白細(xì)胞標(biāo)記 (CD45.1/Ly5.1) 等位基因。使用常用的抗 CD45.1 和 CD45.2抗體,研究人員可以輕松鑒定宿主和移植細(xì)胞,并確定 HSC 在競爭性實驗中發(fā)揮的作用。

在本文中,我們概括性地描述了一項簡單的實驗,這項實驗的具體內(nèi)容是:對經(jīng)照射小鼠進(jìn)行移植后,對其外周血中Cd45.2- 供體與 CD45.1- 宿主白細(xì)胞進(jìn)行測定。
發(fā)布者:貝克曼庫爾特生命科學(xué)
聯(lián)系電話:400 168 5267
E-mail:apls@beckman.com

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