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蛋白質硝酸銀染色試劑盒產(chǎn)品說明書

瀏覽次數(shù):3778 發(fā)布日期:2017-9-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

主要用途

YIJI蛋白質硝酸銀染色試劑是一種旨在使用硝酸銀通過固著、清洗和染色,直接在聚丙烯酰胺凝膠上顯

色,在清晰背景上產(chǎn)生靈敏度10 納克以下蛋白質的銀色條帶的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科

學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于蛋白電泳包括 IEF 的檢測。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便

捷,敏感度高,顯色清晰,重復性好。

技術背景

硝酸銀(AgNO3)的銀離子與蛋白質結合后,化學還原成可見的金屬銀,而顯示染色效果。通常用于蛋白

聚丙烯酰胺凝膠電泳的檢測。可與質譜分析兼容。

產(chǎn)品內容

YIJI 固著液(Reagent A) 毫升

YIJI 處理液(Reagent B) 毫升

YIJI 凈化液(Reagent C) 毫升

YIJI 染色液(Reagent D) 毫升

YIJI 顯色液A(Reagent E) 毫升

YIJI 顯色液B(Reagent F) 微升

YIJI 終止液(Reagent G) 毫升

YIJI 脫色液A(Reagent H) 毫升

YIJI 脫色液B(Reagent I) 毫升

產(chǎn)品說明書 1 份

保存方式

保存 YIJI 染色液(Reagent D)在 4℃冰箱里,避免光照,其余的保存在室溫下,有效保證 12 月

用戶自備

塑料盤:用于染色的容器

無離子水:用于稀釋試劑盒溶液

恒速震蕩器:用于染色操作時的孵育

實驗步驟

實驗開始前,完成SDS-PAGE 蛋白電泳的運行,取出 的膠體,作好定向標記,然后進行下列操作:

一、固著處理

1

 

1. 準備 個 毫升的燒杯,作好 至 號標記

2. 抽取 毫升 YIJI 固著液(Reagent A)到 號燒杯,加入 毫升無離子水,混勻

3. 加入到 大小的染色盤

4. 將聚丙烯酰胺凝膠放進染色盤

5. 在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育 分鐘,

6. 同時抽取 毫升 YIJI 處理液(Reagent B)到 號燒杯,加入 毫升無離子水,混勻

7. 小心倒掉染色盤里的 YIJI 固著液(Reagent A)

8. 加入 毫升 號燒杯里稀釋的 YIJI 處理液(Reagent B)

9. 在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育 分鐘

10.小心倒掉染色盤里的 YIJI 處理液(Reagent B)

11.重復實驗步驟 兩次

12.同時抽取 毫升 YIJI 凈化液(Reagent C)到 號燒杯,加入 毫升無離子水,混勻

13.加入 毫升 號燒杯里稀釋的 YIJI 凈化液(Reagent C)到染色盤

14.在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育 分鐘

15.小心倒掉染色盤里的 YIJI 凈化液(Reagent C)

16.重復實驗步驟 一次

二、染色處理

17.直接抽取 毫升 YIJI 染色液(Reagent D),加入到染色盤

18.在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育 分鐘

19.小心倒掉染色盤里的 YIJI 染色液(Reagent D)

20.加入 毫升自備的無離子水

21.在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育 分鐘

22.小心倒掉染色盤里的無離子水

23.重復實驗步驟 一次

三、顯色處理

24.同時抽取 毫升無離子水到 號燒杯

25.加入 微升 YIJI 顯色液 A(Reagent E)和 微升 YIJI 顯色液 B(Reagent F),混勻

26.加入 毫升 號燒杯里的 YIJI 顯色工作液到染色盤

27.在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育 至 分鐘,蛋白質銀色條帶開始顯現(xiàn)(注意顯色不要過深)

28.小心倒掉染色盤里的 YIJI 顯色工作液(如果染色過深,見實驗步驟 30)

29.直接加入 毫升 YIJI 終止液(Reagent G),直至完成所有拍照和分析

四、脫色處理

30.如果染色過深, 移出 毫升 YIJI 脫色液 A(Reagent H)和 毫升 YIJI 脫色液 B(Reagent I)

到 號燒杯,加入 毫升無離子水,混勻

31.加入 YIJI 脫色工作液到染色盤,

32.在室溫下恒速( RPM)震蕩器上孵育,直至條帶顏色回到滿意狀態(tài)

33.小心倒掉染色盤里的 YIJI 脫色工作液

34.加入 毫升無離子水清洗

五、質譜分析預處理

2

 

35.如果需要進行質譜分析,移出 微升 YIJI 脫色液 A(Reagent H)和 微升 YIJI 脫色液

B(Reagent I)到 毫升離心管,加入 微升無離子水,混勻

36.小心切下蛋白條帶凝膠體

37.放進 毫升離心管,直至條帶完全脫色

注意事項

1. 本產(chǎn)品為10 X 25 毫升規(guī)格

2. 每25 毫升試劑盒溶液用于處理6cm X 8cm 大小膠體;每50 毫升試劑盒溶液用于處理12cm X 12cm 大

小膠體;膠體越大,用量增加

3. 操作時須戴好手套

4. 必須用無離子水稀釋試劑溶液試劑

5. 孵育溫度為室溫

6. 本公司提供3%(YJ12034.1)、8%(YJ12034.3)、10%(YJ12034.4)SDS-PAGE 溶液以及蛋白質考馬斯

亮藍染色試劑盒(YJ30003)、YIJI 蛋白質尼羅紅染色試劑盒(YJ30007)、YIJI 蛋白質 SYPRO 橙

色染色試劑盒(YJ30008)

質量標準

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定染色效果出色

發(fā)布者:上海一基實業(yè)有限公司
聯(lián)系電話:021-60536261
E-mail:2851717098@qq.com

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