病毒包裝技術(shù)8——病毒包裝實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)介紹
銳賽小課堂常識(shí)篇0703-115
病毒包裝實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
第一，細(xì)胞狀態(tài)、載體系統(tǒng)、目的基因?qū)Σ《景b影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等）是三個(gè)主要影響病毒質(zhì)量的因素。
第二，細(xì)胞狀態(tài)需要有豐富的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判斷，比如包裝或轉(zhuǎn)染感染前一定要重視細(xì)胞干凈細(xì)微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細(xì)胞密度適中否等性狀。另外轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的密度要十分注意，一般在70%左右。
第三，建議使用商品化的成熟毒載體系統(tǒng)。
第四，至于包裝轉(zhuǎn)染時(shí)的操作控制細(xì)節(jié)及其轉(zhuǎn)染試劑因素，需要注意，不要在中途細(xì)胞被污染導(dǎo)致整個(gè)過程都需要重復(fù)。
第五，另一個(gè)需要關(guān)注的是目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建和抽提純化環(huán)節(jié)，中抽純化是否污染，純度是否到達(dá)要求等。這些環(huán)節(jié)也是保證病毒質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
第六，目的基因的大小、序列情況、該目的蛋白的功能毒性等能影響導(dǎo)致包裝的成功與否，我們可以通過更換病毒包裝載體系統(tǒng)，嘗試其他載體系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)目的。
病毒包裝實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
第一，細(xì)胞狀態(tài)、載體系統(tǒng)、目的基因?qū)Σ《景b影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等）是三個(gè)主要影響病毒質(zhì)量的因素。
第二，細(xì)胞狀態(tài)需要有豐富的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判斷，比如包裝或轉(zhuǎn)染感染前一定要重視細(xì)胞干凈細(xì)微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細(xì)胞密度適中否等性狀。另外轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的密度要十分注意，一般在70%左右。
第三，建議使用商品化的成熟毒載體系統(tǒng)。
第四，至于包裝轉(zhuǎn)染時(shí)的操作控制細(xì)節(jié)及其轉(zhuǎn)染試劑因素，需要注意，不要在中途細(xì)胞被污染導(dǎo)致整個(gè)過程都需要重復(fù)。
第五，另一個(gè)需要關(guān)注的是目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建和抽提純化環(huán)節(jié)，中抽純化是否污染，純度是否到達(dá)要求等。這些環(huán)節(jié)也是保證病毒質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
第六，目的基因的大小、序列情況、該目的蛋白的功能毒性等能影響導(dǎo)致包裝的成功與否，我們可以通過更換病毒包裝載體系統(tǒng)，嘗試其他載體系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)目的。
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參考鏈接:http://www.research-bio.com/h-col-159.html
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