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iTRAQ定量蛋白組學:蛋白質差異表達定量的原理解析

瀏覽次數:738 發布日期:2024-1-14  來源:百泰派克生物科技

一、引言:iTRAQ技術的概述

iTRAQ(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)是一種相對和絕對定量的同位素標記技術,廣泛應用于蛋白質組學研究中。iTRAQ技術通過標記蛋白質或肽段,實現蛋白質的定量分析,從而揭示蛋白質在生物過程中的動態變化。
 

二、iTRAQ技術的工作原理

 

iTRAQ技術的核心是利用同位素標記試劑,對蛋白質樣本進行標記。這些標記試劑由兩部分組成:平衡區和報告區。平衡區保證標記后的肽段具有相同的質量,而報告區在質譜分析時產生不同的碎片離子,用于定量分析。

圖1

三、iTRAQ技術的操作流程

 

iTRAQ技術的操作流程主要包括樣本處理、酶切、標記、混合、分離和質譜分析等步驟。其中,樣本處理是實驗的基礎,包括蛋白質的提取、純化和濃縮等;酶切是將蛋白質切割成肽段,為后續的標記提供便利;標記是將iTRAQ試劑與肽段結合,形成標記肽段;混合是將不同樣本的標記肽段混合在一起,進行質譜分析;分離是通過液相色譜將混合肽段進行分離,以提高質譜分析的準確性;質譜分析是通過質譜儀對肽段進行分析,獲取蛋白質的定量信息。

圖2

四、iTRAQ技術的優勢與局限性

 

iTRAQ技術具有多樣本同時分析、高通量、高靈敏度和高準確性等優點,是蛋白質組學研究的重要工具。然而,iTRAQ技術也存在一些局限性,如標記效率的不確定性、標記偏好性以及數據處理的復雜性等。

五、結語:iTRAQ技術的未來展望

 

隨著科研技術的不斷發展,iTRAQ技術在蛋白質組學研究中的應用將更加廣泛。同時,對iTRAQ技術的改進和優化也將不斷推進,以解決其存在的局限性,提高蛋白質定量分析的準確性和可靠性。

發布者:北京百泰派克生物科技有限公司
聯系電話:010-67869385
E-mail:market@biotech-pack.com

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