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定量蛋白質(zhì)譜技術在提升生物制品質(zhì)量控制與疾病診斷的精準性中的應用

瀏覽次數(shù):734 發(fā)布日期:2023-12-29  來源:百泰派克生物科技

蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)執(zhí)行許多重要功能的關鍵分子。定量蛋白質(zhì)譜是一種強大的分析技術,可以準確測量樣品中的蛋白質(zhì)含量,并提供關于蛋白質(zhì)結構和功能的有價值信息。這項技術在生物制品質(zhì)量控制和疾病診斷領域具有重要的應用價值。本文將重點介紹定量蛋白質(zhì)譜技術的原理、方法和最新的前沿技術,展示其在提高生物制品質(zhì)量控制和疾病診斷精準性方面的巨大潛力。

一、定量蛋白質(zhì)譜技術的原理

定量蛋白質(zhì)譜是通過將蛋白質(zhì)樣品與質(zhì)譜儀結合,利用離子化技術將蛋白質(zhì)分子轉化為離子,然后通過質(zhì)譜儀對這些離子進行檢測和定量。其中,質(zhì)譜儀通常包括質(zhì)量分析器和離子源兩個主要組成部分。質(zhì)量分析器可以根據(jù)離子的質(zhì)荷比(m/z)比較準確地確定離子的質(zhì)量,從而確定蛋白質(zhì)的組成和結構。

二、定量蛋白質(zhì)譜技術的方法

定量蛋白質(zhì)譜技術有多種不同的方法,其中最常用的方法之一是基于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)的定量分析。這種方法利用液相色譜將蛋白質(zhì)樣品分離,并將其引入質(zhì)譜儀進行定量分析。另外,也有基于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)的定量蛋白質(zhì)譜方法,適用于描繪氣相易揮發(fā)的蛋白質(zhì)分子。

圖1

三、定量蛋白質(zhì)譜的前沿技術

近年來,定量蛋白質(zhì)譜領域涌現(xiàn)出一些令人激動的前沿技術,極大地提升了質(zhì)譜分析的精確性和靈敏度。例如,多重反應監(jiān)測(MRM)是一種高度選擇性和靈敏度的定量蛋白質(zhì)譜方法,可以在復雜樣品中同時檢測和定量多個特定的蛋白質(zhì)。此外,蛋白質(zhì)同位素標記技術也被廣泛應用于定量蛋白質(zhì)譜中,通過將同位素標記劑與樣品混合,可以實現(xiàn)對蛋白質(zhì)樣品中特定蛋白質(zhì)的準確定量。

圖2

近年來,定量蛋白質(zhì)譜領域涌現(xiàn)出一些令人激動的前沿技術,極大地提升了質(zhì)譜分析的精確性和靈敏度。這些前沿技術在蛋白質(zhì)定量和定性分析方面取得了突破,并且為生物制品質(zhì)量控制和疾病診斷帶來了更高的精準性。以下是其中一些重要的前沿技術:

a. 多重反應監(jiān)測(MRM):

多重反應監(jiān)測是一種高度選擇性和靈敏度的定量蛋白質(zhì)譜方法,也被稱為靶向定量。它基于事先確定的蛋白質(zhì)肽段和其特定的質(zhì)荷比(m/z)進行定量分析。在這種方法中,使用質(zhì)譜儀以串行模式檢測多個預定義的肽段,從而實現(xiàn)同時檢測和定量多個特定的蛋白質(zhì)。MRM技術具有極高的靈敏度和準確性,能夠在復雜樣品中準確測量目標蛋白質(zhì)的濃度,尤其在生物藥物監(jiān)測和生物標志物研究中得到廣泛應用。

圖3

b. 蛋白質(zhì)同位素標記技術:

蛋白質(zhì)同位素標記技術是一種基于質(zhì)譜的定量方法,通過引入同位素標記劑與樣品混合,實現(xiàn)對特定蛋白質(zhì)的準確定量。同位素標記劑可以是穩(wěn)定同位素或化學標記物,其與待測蛋白質(zhì)進行共價結合。通過與非標記劑比較,可以準確測量蛋白質(zhì)的相對豐度或絕對濃度。這種方法能夠解決樣品間的變異性和分析誤差,提高定量結果的可靠性。蛋白質(zhì)同位素標記技術廣泛應用于生物制藥中的質(zhì)量控制和蛋白質(zhì)組學研究。

c. 干擾素蛋白質(zhì)譜圖譜分析:

干擾素是一類重要的生物制品,用于治療多種疾病。然而,不同批次之間的質(zhì)量一致性是一個挑戰(zhàn)。近年來,基于定量蛋白質(zhì)譜的干擾素蛋白質(zhì)譜圖譜分析成為提高質(zhì)量控制的關鍵技術。通過建立干擾素樣品的質(zhì)譜圖譜數(shù)據(jù)庫,并將其與待測樣品進行比對,可以檢測到潛在的異常或變異。這種方法能夠?qū)崟r監(jiān)測和評估干擾素的質(zhì)量特征,提供了更準確的質(zhì)量控制手段。

d. 高分辨率質(zhì)譜(HRMS):

高分辨率質(zhì)譜是一種基于質(zhì)譜的定量和定性分析方法,具有較高的分辨率和質(zhì)量準確性。相比于傳統(tǒng)質(zhì)譜儀,高分辨率質(zhì)譜可以更準確地確定離子的質(zhì)量,提供更可靠的蛋白質(zhì)定量結果。通過與高分辨率質(zhì)譜儀結合的液相色譜或氣相色譜,可以實現(xiàn)更高的分離效果和更準確的質(zhì)譜數(shù)據(jù)獲取。高分辨率質(zhì)譜在蛋白質(zhì)組學研究、代謝組學分析和疾病標志物發(fā)現(xiàn)中具有重要應用價值。

四、定量蛋白質(zhì)譜在生物制品質(zhì)量控制中的應用

生物制品,如蛋白質(zhì)藥物和疫苗,對其質(zhì)量的嚴格控制至關重要。定量蛋白質(zhì)譜技術可以提供對生物制品中蛋白質(zhì)含量和組成的準確測量,確保產(chǎn)品的一致性和穩(wěn)定性。此外,通過比較不同批次產(chǎn)品的蛋白質(zhì)譜圖譜,可以檢測到可能存在的異常或變異,并及時采取措施。

五、定量蛋白質(zhì)譜在疾病診斷中的應用

定量蛋白質(zhì)譜技術也在疾病診斷領域發(fā)揮著重要作用。通過對體液樣品(如血液、尿液等)中的蛋白質(zhì)進行定量分析,可以發(fā)現(xiàn)與特定疾病相關的蛋白質(zhì)標志物。這些標志物的檢測和定量可以為早期疾病診斷、疾病進展監(jiān)測以及治療反應評估提供寶貴的信息。

定量蛋白質(zhì)譜技術作為一種先進的分析方法,為生物制品質(zhì)量控制和疾病診斷提供了精確、敏感和可靠的工具。隨著不斷涌現(xiàn)的前沿技術的應用,定量蛋白質(zhì)譜將繼續(xù)在生物醫(yī)學領域發(fā)揮重要作用,促進藥物研發(fā)和疾病治療的進步。

發(fā)布者:北京百泰派克生物科技有限公司
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