蛋白質表達與純化
我公司擁有豐富的蛋白質表達及純化經驗,以客戶提供的表達克隆開始,進行條件的優化,為客戶提供所需蛋白質。
服務編號 |
服務內容 |
制備時間 |
技術參數 |
價 格 |
bs-P01 |
純化5mg蛋白質(客戶提供表達質粒或菌株) |
4周工作日 |
蛋白純度(電泳純≧85%) |
4000元/5mg |
bs-P02 |
純化10mg的蛋白質(客戶提供表達質;蚓) |
4周工作日 |
蛋白純度(電泳純≧85%) |
6000元/10mg |
技術報告 |
提供詳細的純化蛋白報告及實驗過程、步驟、檢測報告(委托制備,簽訂正式合同文本) |
客戶需要提供的信息及材料:
1.待表達基因的序列
2.表達載體的序列(質譜圖)
3.表達克隆質粒和菌株
注:目前只承接提供帶GST標簽、His標簽的融合蛋白表達及純化,其它標簽蛋白需協商。
分子生物學技術服務
序 號 |
服務名稱 |
價 格 |
一 |
DNA抽提及純化 |
面議 |
二 |
RNA抽提及純化 |
面議 |
三 |
mRNA分離及純化 |
面議 |
四 |
PCR及產物純化 |
面議 |
五 |
質粒抽提 |
面議 |
六 |
RT-PCR |
面議 |
七 |
載體構建 |
面議 |
八 |
RNA干擾 |
面議 |
服務詳細介紹
一、DNA抽提及純化
根據客戶要求,利用指定試劑盒,對動物(組織、細胞、血液等)、植物(各種組織)、微生物、病毒等進行DNA抽提及純化。
提供結果:DNA、電泳圖、OD值及定量結果(濃度及體積)。
二、RNA抽提及純化
根據客戶要求,利用指定試劑盒或自產試劑盒(主要針對特殊組織,如含次生代謝產物豐富的植物組織等),對動物(組織、細胞、血液等)、植物(各種組織)、微生物、病毒等進行RNA抽提及純化。
提供結果:RNA、電泳圖、OD值及定量結果(濃度及體積)。
三、mRNA分離及純化
根據客戶要求,利用Qiagen公司分離純化試劑盒或國產分離純化試劑盒,對總RNA進行mRNA的分離及純化,以獲得高質量的mRNA用于后續的建庫等工作。
提供結果:mRNA、電泳圖及定量結果(濃度及體積)。
四、PCR及純化
根據客戶要求,利用客戶提供的樣品及引物,進行批量PCR并進行產物純化,包括前期的轉化、鋪板、挑菌、搖菌等工作,可提供全程服務。純化建議采用millipore公司純化板。
提供結果:PCR產物、電泳圖及定量結果(濃度及體積)。
五、質粒抽提
根據客戶要求,利用進口或國產試劑盒,對客戶提供樣品進行質粒小抽或大抽。為客戶提供內毒素含量達到科研級和醫藥級的質粒DNA。
提供結果:質粒、實驗報告(包括質粒電泳照片、鑒定結果及OD值測定結果)、1.7≤OD260/OD280≤2.0的質粒。
六、RT-PCR檢測
RT-PCR是以RNA為起始材料經逆轉錄反應產生cDNA,再以cDNA為模板進行PCR擴增以獲取目的基因,用于檢測細胞或組織中基因表達變化。
實驗流程:包括RNA制備、RT反應、PCR反應等。
引物要求:最好由服務方設計并合成。如果客戶提供,需提供引物序列;引物若為干粉,請提供引物的準確量;若為稀釋液,請提供引物的最終濃度(每個反應所需的引物滿足以下要求:濃度≥10pm/μl,體積≥10μl)。
結果報告內容:電泳圖譜及相關說明;實驗流程。
七、載體構建
載體構建是將目的基因與載體連接并轉化得到重組質粒的過程,客戶需提供來源可靠的組織,細胞或血液以便用于目的基因的擴增。
1、原核表達載體的構建、誘導表達和蛋白純化
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉化、挑選陽性克隆、測序、誘導表達、蛋白純化
提供結果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴增電泳圖片*1份
(3)、重組質粒菌種或者質粒(30ul)*1份
(4)、純化后蛋白
(5)、實驗報告*1份
2、真核表達載體的構建
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉化、挑選陽性克隆、測序
提供結果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴增電泳圖片*1份
(3)、重組質粒菌種或者質粒(30ul)*1份
(4)、實驗報告*1份
3、腺病毒載體構建及病毒包裝服務
* 目的基因克隆載體的構建
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉化、挑選陽性克隆、測序
提供結果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴增電泳圖片*1份
(3)、重組質粒菌種或者質粒(30ul)*1份
(4)、實驗報告*1份
* 目的基因表達載體構建
實驗過程:酶切,連接,轉化,挑選陽性克隆,PCR鑒定,酶切鑒定
提供結果:
(1)、PCR鑒定圖片*1份
(2)、酶切鑒定圖片*1份
(3)、實驗報告*1份
* 包裝腺病毒
實驗過程:酶切,共轉染細胞,細胞培養,鑒定,純化,測定濃度
提供結果:
(1)、實驗報告*1份
(2)、轉染后圖片*1份
(3)、包裝好的病毒*1份(滴度>5*107)
4、慢病毒載體構建及病毒包裝服務
* 目的基因克隆載體的構建
實驗過程:RNA抽提、RT-PCR、連接、轉化、挑選陽性克隆、測序
提供結果:
(1)、提供測序報告*1份
(2)、PCR擴增電泳圖片*1份
(3)、重組質粒菌種或者質粒(30ul)*1份
(4)、實驗報告*1份
* 目的基因表達載體構建
實驗過程:酶切,連接,轉化,挑選陽性克隆,PCR鑒定,酶切鑒定
提供結果:
(1)、PCR鑒定圖片*1份
(2)、酶切鑒定圖片*1份
(3)、實驗報告*1份
* 包裝慢病毒
實驗過程:酶切,共轉染細胞,細胞培養,鑒定,純化,測定濃度
提供結果:
(1)、實驗報告*1份
(2)、轉染后圖片*1份
(3)、包裝好的病毒*1份(檢測滴度)
八、RNA干擾服務
近年來研究表明,將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞,可以使mRNA發生特異性降解,導致其相應基因的沉默。
這種轉錄后基因沉默的機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾(RNAi):
1、siRNA的設計及合成,由客戶自行設計,或由公司代為設計目前已證實的siRNA,以及陰性對照,并由DNA合成儀合成
2、構建RNAi干擾載體,PCR及測序鑒定
3、PCR檢測mRNA表達以及western blotting檢測蛋白的表達
提供結果:
1、PCR鑒定圖片*1份
2、提供測序報告*1份
3、酶切鑒定圖片*1份
4、RT-PCR電泳圖*1份
5、western blotting結果*1份
6、實驗報告*1份
bio-equip.com
北京博奧森生物技術有限公司成立于2001年,注冊資本2000萬元,是集免疫學科研試劑研發、生產、銷售為一體的國家高新技術企業。在公司近1300平米的研發中心樓內,擁有SPF級實驗動物房、GMP級單克隆抗體制備平臺,同時購置了CSBio多肽合成儀、Akta全自動液相色譜系統、BD流式細胞儀、Leica冷凍切片機等多種生產、檢測儀器。公司還擁有一批技術精湛、經驗豐富的科研開發團隊,在免疫和分子生物學等領域擁有多項自主知識產權。
自成立之初,公司始終秉持“自主研發、原始創新,為全球生命科學研究提供優質服務”的經營理念。提供全面的科研抗體、試劑,診斷抗體原料,以及CRO服務。公司現擁有近兩萬種抗體產品,涵蓋人蛋白靶點13000多個。特色產品有特異磷酸化抗體及專利授權AF熒光標記抗體等。此外,公司還提供完善的單/多克隆抗體制備、標記、重組蛋白、多肽合成及各項免疫學檢測技術服務等。公司恪守ISO9001:2008國際質量管理體系認證要求,致力于打造“Bioss”精品抗體品牌。 2010年博奧森(波士頓)在美國設立了面向全球抗體市場的商務拓展及國際市場營銷總部,不斷擴展全球銷售體系,主打Bioss國際品牌,向全球科研工作者提供高質量的科研抗體產品。迄今為止,Bioss產品已遍布全球多個國家和地區,并已成為數家國際知名抗體公司的OEM合作伙伴。Bioss抗體產品已出現在數千篇高質量SCI文章中,獲得了全世界眾多生命科學領域科研人員的認可。
百舸爭流,只爭朝夕。近二十年的探索和拼搏,為Bioss品牌在免疫學試劑領域奠定了堅實的基礎。我們將在未來勇于開拓,自主創新,為生命科學研究提供更加優質的產品和服務,回報全球用戶的信任,為生命科學進步盡綿薄之力。
溫馨提示:產品僅用于實驗室科研及非臨床用途。