圖1：（a）不同批次樣品光阻法測(cè)試每次取樣的測(cè)試結(jié)果；
（b）最終統(tǒng)計(jì)的每容器中的不同尺寸范圍的微粒數(shù)量；


圖2：顯微計(jì)數(shù)法測(cè)試結(jié)果，每容器中不同尺寸范圍的微粒數(shù)量；

在兩項(xiàng)檢查中可以看到樣品中的不溶性微粒數(shù)量都在藥典要求范圍之內(nèi)，但是該樣品進(jìn)行光阻法測(cè)試前對(duì)樣品進(jìn)行了稀釋操作，可能會(huì)引發(fā)樣品內(nèi)的顆粒數(shù)量發(fā)生變化。

案例二：某公司的脂質(zhì)納米粒（樣品裝量信息：1.5 mL*1批）
光阻法測(cè)試方案：樣品原液測(cè)試，單次進(jìn)樣量為0.1 mL，連續(xù)測(cè)四次，舍棄第一次結(jié)果，最終統(tǒng)計(jì)每毫升中尺寸≥10 μm的顆粒數(shù)以及≥25 μm的顆粒數(shù)；

顯微計(jì)數(shù)法測(cè)試方案：樣品原液進(jìn)行測(cè)試，統(tǒng)計(jì)每毫升中尺寸≥10 μm的顆粒數(shù)以及≥25 μm的顆粒數(shù)；

圖3：采用光阻法和顯微計(jì)數(shù)法對(duì)樣品進(jìn)行不溶性微粒檢測(cè)的不同尺寸范圍的顆粒數(shù)量統(tǒng)計(jì)

該樣品采用兩種方法進(jìn)行測(cè)試的結(jié)果測(cè)試對(duì)比差距較大，光阻法測(cè)試結(jié)果中不同尺寸范圍的顆粒比較少，這歸因于測(cè)試過(guò)程中的進(jìn)樣量比較少，可能無(wú)法完整覆蓋光阻法設(shè)備的光學(xué)檢測(cè)窗口；另外通過(guò)顯微計(jì)數(shù)法測(cè)試結(jié)果的原始圖片數(shù)據(jù)可以看出，樣品中較大尺寸顆粒主要包括纖維、藥物聚集及膠塞等，這些顆粒的存在可能是造成樣品中不溶性微粒增多的原因之一。

數(shù)據(jù)分析與討論：
從上面的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析來(lái)講，脂質(zhì)體類樣品更適合用顯微計(jì)數(shù)法來(lái)進(jìn)行樣品的不溶性微粒檢測(cè)，其原因如下：

1. 脂質(zhì)體類樣品裝量較小，通常為幾毫升，甚至不到一毫升，樣品的稀釋可能會(huì)對(duì)樣品體系里的顆粒數(shù)量產(chǎn)生影響，另外少量的樣品不一定能覆蓋光阻法設(shè)備的檢測(cè)窗口，從而會(huì)產(chǎn)生測(cè)試誤差；
2. 脂質(zhì)體類樣品具有一定的濁度，采用光阻法進(jìn)行測(cè)試時(shí)，會(huì)形成測(cè)量誤差，可以看到單個(gè)樣品每次測(cè)試數(shù)據(jù)不穩(wěn)定，這主要是歸因于光阻法原理設(shè)備測(cè)試渾濁樣品粒度存在固有缺陷；
3. 脂質(zhì)體類樣品中的顆粒大小會(huì)隨物理環(huán)境的變化形成聚集態(tài)，圖像法粒度儀可以直接觀察到這些顆粒，亦可以觀察到外來(lái)顆粒，有利于顆粒的溯源分析；

總結(jié)：
回歸到藥典法規(guī)文件的要求，文件中指出：當(dāng)光阻法的測(cè)定結(jié)果不符合規(guī)定或者供試品不適用于用光阻法進(jìn)行測(cè)定時(shí)，應(yīng)采用顯微計(jì)數(shù)法進(jìn)行檢測(cè)，并且以顯微計(jì)數(shù)法的測(cè)定結(jié)果為判定依據(jù)。經(jīng)過(guò)對(duì)脂質(zhì)體案例測(cè)試結(jié)果的分析可以看出，脂質(zhì)體類注射劑的不溶性微粒檢查項(xiàng)應(yīng)優(yōu)先推薦顯微計(jì)數(shù)法。