磁珠法糞便提取試劑盒操作指南
常規(guī)樣本的核酸提取
想必已不再是實(shí)驗(yàn)黨們頭疼的對象了吧
然鵝，糞便基因組DNA提取步驟實(shí)在繁瑣
還可能遇到提取濃度低，純度差等問題
簡直天崩地裂啊
沒關(guān)系，這點(diǎn)小事MP幫你解決!
拿好這份指南
讓你的糞便DNA提取實(shí)驗(yàn)事半功倍
【 PART 01-預(yù)洗 】
預(yù)洗操作
1.向Lysing Matrix E管中加入樣本，再加入1mL Pre-wash Buffer，用渦旋震蕩儀渦旋至糞便樣本被完全重懸起來。
2.因糞便狀態(tài)而異，渦旋時(shí)間控制在1min以內(nèi)，時(shí)間過長會導(dǎo)致一部分細(xì)胞或菌體破裂，損失一部分DNA。
3.12000rpm，離心5min，棄去上清，保留沉淀。
除了按照預(yù)洗操作執(zhí)行以外，對于各類型的樣本也會有不同注意事項(xiàng)：
【 PART 02-裂解與去雜 】
裂解：樣本預(yù)洗后，向Lysing Matrix E中依次加入裂解液的三種成分：Lysis Buffer F1、Lysis Buffer F2、RNase A，渦旋混勻。
使用FastPrep-24TM 5G研磨儀，5 m/s，研磨40s或用渦旋震蕩儀以最大速度渦旋10 min，離心后保留上清液，棄去沉淀。
去雜質(zhì)：將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中，添加去雜劑：PPS，主要用于去除蛋白等雜質(zhì)。在4℃放置5 min能提高效果，離心后，保留上清液，棄去沉淀。
【 PART 03-結(jié)合-漂洗-洗脫 】
圖 |磁珠法提取
這三個(gè)步驟可以手工操作，也可以配合自動(dòng)化核酸提取儀實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化批量操作。一般來說，手工提取預(yù)計(jì)在40-45 min左右完成，采用MP公司的24孔磁力架（貨號 116570413），可以一次處理24個(gè)樣本。而采用自動(dòng)化儀器提取，隨著樣本數(shù)量的增加，操作時(shí)間并不延長，樣品處理量成倍增加，效率大大提高，從此解放雙手。
圖 |24孔磁力架
手工操作
自動(dòng)化操作
1. 將400 µL上清液轉(zhuǎn)移至 96 孔板從左至右的第二列中，并按照下表在各添加其他試劑。
2. 按照下表設(shè)置程序，運(yùn)行自動(dòng)化核酸提取儀。
【 訂購信息 】
如有任何技術(shù)問題，歡迎來電咨詢400-1500-680或添加官方微信：MPBiomedicalsSH，
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