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貓三聯疫苗的工藝與應用

瀏覽次數:1413 發布日期:2024-7-24  來源:百林科
隨著現代家庭中寵物貓數量崛起,帶來了空前繁榮的“貓經濟”,數據顯示,2022年寵物貓數量增加至6536萬只,未來還會持續增長。與此同時貓傳染病的預防與防疫顯的尤為重要。

其中貓杯狀病毒病、貓病毒性鼻氣管炎、貓泛白細胞減少癥是貓的重要傳染病,可導致貓呼吸道和腸道等疾病發生,會造成貓的跋行、流產、慢性胃腸炎等,嚴重的情況下,甚至導致死亡。

疫苗則是預防這些疾病最好的方式,針對這三種疾病的疫苗已有上市產品在售

貓三聯疫苗一般是指可以同時預防皰疹病毒,杯狀病毒,貓泛白細胞減少病毒(貓瘟)的三合一滅活疫苗,也就是一種疫苗可以對抗三種病毒;已上市產品-碩騰的妙三多,從推薦的免疫程序上,需要打四針。具體免疫程序可見下面。
 圖片來源于網絡

目前國內外的企業在貓三聯疫苗的開發上均有顯著的進展,以下是“貓三聯”疫苗的開發進度。其中已有多家動物疫苗單位與百林科在下游的工藝開發和生產中有合作。


以下簡單列舉貓三聯疫苗的一些典型工藝路線:


 
其中制備貓三聯常用的細胞系為貓腎細胞F81或者CRFK細胞,屬于貼壁培養型細胞,經過培養的病毒進行相應的下游澄清過濾以及超濾等方式進行初純,其次用層析法進一步降低目標物中的雜質殘留,如HCP,HCD等進一步減少副反應。

常見的貓瘟病毒普遍在18nm以上,可以通過專門為病毒或者大分子設計的一款復合模式層析填料MaXtar® COLL400 流穿模式進行有效的純化,該方法操作條件靈活,工藝相對容易重復和執行,且不需要過多的參數摸索,目前有多款人用疫苗和獸用疫苗使用類似的復合模式填料進行了商業化生產。

MaXtar® COLL 400 在貓三聯疫苗純化中的應用(不同流速的影響研究):
  • 柱子信息:16*16.7cm  CV:33.4ml
  • Buffer:20mM PB+0.1M Nacl pH 6.5
分別采用330cm/h,150cm/h,60cm/h 的流速進行上樣。

 
結論此三次實驗分別采用330cm/h,150cm/h,60cm/h 的流速進行上樣,回收率均達到預期,MaXtar® COLL 400 在低流速情況下同樣能保證回收率,并在100L規模放大生產中達到預期結果。

MaXtar® COLL 400/700產品簡介:
獨特的雙層結構設計,外殼是多孔的鈍化層 ,確保 400 KD或700 KD 以上的大分子不會進孔,直接走外水流穿;核心是偶聯了同時具有疏水和吸附負電荷作用基團的球形內核,最大程度結合宿主蛋白、 核酸等雜質。具有明顯優勢:
  • 以流穿模式處理400 KD 或700 KD 以上的大分子,工藝優化更容易,更方便線性放大。
  • 改良的MaXtar® 基架具有更強剛性,因此在較低的反壓下能夠實現更高工藝流速,提高工藝效率。
  • 相比于傳統的凝膠過濾層析,擁有更大的上樣量,更高流速,生產效率大大提升。
  • 耐受范圍廣,化學穩定性好。
  • 適用于病毒及類病毒顆粒等生物大分子分離。
 
MaXtar® COLL 400/700應用過程中的Tips:
為最大程度發揮COLL系列內部的多種配基吸雜效果,建議在緩沖液中添加100~150mM NaCl。
◆ 由于雜質與內部配基之間的高效多模式結合,需要對填料進行有效清潔,建議使用1M NaOH, 30%異丙醇。
◆ 不推薦使用檸檬酸鹽緩沖液,因為檸檬酸離子會與配基相互作用。
 
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發布者:百林科醫藥科技(上海)有限公司
聯系電話:400-058-9000
E-mail:info@biolink.com

標簽: 層析填料
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