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新冠疫苗接種者體內RBD抗體及中和抗體檢測方法和結果分析

瀏覽次數:8346 發布日期:2021-2-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

新冠疫苗保護性能評估
為了應對新冠疫情威脅,目前已經有很多國家開始了疫苗接種工作,但接種新冠疫苗后,產生的保護效果并不確定,評估新冠疫苗有效性的重要指標之一就是接種者體內中和抗體的含量。針對大規模疫苗接種后的人群,使用簡單、快速的膠體金免疫層析法,可快速評估每個接種者體內的抗RBD抗體及中和抗體的水平。

 

RBD結合抗體

采用膠體金免疫層析技術,通過雙抗原夾心法測試RBD結合抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區,血清會在毛細作用下向前層析,結合墊上的膠體金會溶解,然后和血清一起向前移動。血清到達檢測區后,膠體金標記的S-RBD、血清中的抗體與檢測線上包被的S-RBD形成復合物,表現為檢測線顯色,血清中的抗體含量與檢測線顯色強度成正相關。反應結束后,直接肉眼觀察顯**況或采用膠體金檢測儀進行測試。通過檢測線和質控線上膠體金顯色強弱,可判斷RBD抗體的含量。該方法可檢測血清、血漿及其他分泌物中含有可與RBD相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

 

膠體金免疫層析檢測RBD結合抗體

 

應用場景

血清中RBD抗體篩查、早期患者血清學診斷及疫苗臨床效果評價—抗RBD總抗體檢測。

 

測試結果

標記: 膠體金標記S-RBD (b46003P)和膠體金標記兔IgG (0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (0295G),T線為S-RBD (46003P/46005P)

 

備注:“+++”表示反應很強;“++”表示反應較強;“+”表示反應較弱;“±”反應很弱;“-”表示無反應。

 

RBD中和抗體

采用膠體金免疫層析法的競爭法測試RBD中和抗體:取接種疫苗后的血清滴在試紙條加樣區,血清會在毛細作用下向前層析,結合墊上的膠體金會溶解,然后和血清一起向前移動。血清到達檢測區后,膠體金標記的S-RBD與檢測線上包被的ACE2結合,并被固定在檢測線上,表現為檢測線顯色,而血清中的中和抗體會與檢測線上的ACE2競爭結合S-RBD,從而導致固定在檢測線上的S-RBD減少,檢測線顯色下降。反應結束后,直接肉眼觀察顯**況或采用膠體金檢測儀進行測試。通過檢測線和質控線上膠體金顯色強弱,可判斷中和抗體抑制效果。該方法可檢測血清、血漿中可阻斷RBD-ACE2相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬及抗體型別的限制。

 

膠體金免疫層析檢測RBD中和抗體

 

應用場景

疫苗臨床效果評價、康復者血清中保護性抗體水平檢測—模擬病毒侵襲細胞過程,通過阻斷RBD與ACE2的結合間接評價機體內抗RBD中和性抗體的水平。

 

測試結果

標記: 膠體金標記RBD (46003P)和膠體金標記兔IgG (0295P)包被: C線為羊抗兔IgG (0295G),T線為Human ACE2 (46001P/46002P)

 

備注:“+++”表示反應很強;“++”表示反應較強;“+”表示反應較弱;“±”反應很弱;“-”表示無反應。

 

由此可見,陰性血清無中和活性,而陽性血清中含有中和性抗體,血清稀釋倍數在1:200時可完全阻斷RBD與ACE2的結合。

發布者:上海雅吉生物科技有限公司
聯系電話:021-34661276
E-mail:58268971@qq.com

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