繼上周整理的泛素化蛋白快速富集純化的解決方案后，最近又有客戶問“我想在體外檢測組織中的一個蛋白是否在處理因素作用后發生泛素化，請問有這方面的實驗方法嗎，或者試劑盒嗎？”作為泛素研究領域的專家，LifeSensors可為您提供全面的泛素研究解決方案，如何鑒定靶蛋白是否發生泛素化修飾？你問了，我安排！

 

 

       如何判斷蛋白是否泛素化? 是哪種類型的泛素化修飾？ UbiTest可以給您答案。

 

       UbiTest檢測原理：先通過TUBEs富集純化樣本中的泛素化總蛋白，隨后，將分離到的泛素化蛋白經或者不經去泛素化酶DUBs處理，（+）/（-）DUBs處理的蛋白樣本用靶蛋白的特異性抗體進行免疫印跡（WB）分析，通過條帶比對分析實現對泛素化蛋白的定性及半定量檢測。

 

 

 

       實例分析==＞

 

       樣本：Jurkat細胞裂解液

 

       實驗目的：MDM2和TNF-R1蛋白是否泛素化

 

       實驗流程：通過TUBEs富集純化樣本中的泛素化總蛋白，經去泛素化酶DUBs處理，后，用靶蛋白的特異性抗體進行WB檢測

 

 

       檢測抗體：MDM2抗體

 

       Lane 1: 富集純化的蛋白樣本不經DUBs處理

       Lane 2: 富集純化的蛋白經廣譜型的DUBs處理（可以去除所有類型的多聚泛素鏈）

       Lane 3: 富集純化的蛋白經特異性針對K48-泛素鏈的去泛素化酶處理（只能水解K48-泛素鏈）

 

       結果：Lane 2的條帶信號（~55kda）與Lane 1相比明顯增強，說明MDM2被泛素化修飾了

 

       Lane 3的條帶信號（~55kda）與Lane 1相比有所增加，但是比Lane 2的信號明顯減弱，說明特異性針對K48-泛素鏈的去泛素化酶并沒有水解掉靶蛋白近端的泛素，或者說MDM2還存在其他連接類型的多聚泛素鏈。

 

 

       檢測抗體：TNF-R1抗體

 

       Lane 1: 富集純化的蛋白樣本不經DUBs處理

       Lane 2: 富集純化的蛋白經廣譜型的DUBs處理（可以去除所有類型的多聚泛素鏈）

       Lane 3: 富集純化的蛋白經特異性針對K63-泛素鏈的去泛素化酶處理（只能水解K63-泛素鏈）

 

       結果：Lane 2的條帶信號（~50kda）與Lane 1相比明顯增強，說明TNF-R1被泛素化修飾了

 

       Lane 3的條帶信號（~140kda）與Lane 1相比明顯減弱，Lane 3的條帶信號（~50kda）與Lane 1相比有所增強，說明TNF-R1的泛素化類型為K63，但是還存在其他類型的泛素化修飾，所以比Lane 2的信號弱很多。

 

貨號	名稱	產品說明
UM411	UbiTest Agarose-TUBE Elution Kit	鑒定靶蛋白是否泛素化
UM411M	UbiTest Magnetic TUBE Elution Kit
UM413	K63 Linkage Specific UbiTest – Agarose TUBE Elution Kit	鑒定靶蛋白是否泛素化以及是否存在K63-泛素化修飾
UM413M	K63 Linkage Specific UbiTest – Magnetic TUBE Elution Kit
UM414	K48 Linkage Specific UbiTest – Agarose TUBE Elution Kit	鑒定靶蛋白是否泛素化以及是否存在K48-泛素化修飾
UM414M	K48 Linkage-Specific UbiTest – Magnetic TUBE Elution Kit
UM412	Linkage Profiling UbiTest – Agarose TUBE Elution Kit	鑒定靶蛋白是否泛素化以及是否存在K63/K48-泛素化修飾
UM412M	Linkage-Specific UbiTest – Magnetic TUBE Elution Kit

 

       看到這兒，您心動了嗎？馬上聯系小艾吧！

 

       或者掃描下方二維碼，即可聯系您的專屬客服哦~

 

 

       作為一家具有高端的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業，總部位于武漢光谷高新技術開發區，服務面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司，為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品、整合的解決方案，及優質的物流服務。為了更好的服務客戶，公司組建了一支經驗豐富的研發團隊-艾美捷生物技術中心，進入研發生產階段，將更優質的產品推薦給國內生物領域的同仁們!

 

       艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商優保持著密切的合作關系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等，可以在短時間內為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品及物流服務。