我們時常會遇到，明明染色Marker都來自一篇文獻，但是最后實驗結果卻變成“買家秀與賣家秀”。 
 
產生這種現象的原因是什么？以及我們為什么要如何優化我們的染色方案呢？我們先看具體的例子。
 
方案1與方案2，所選擇的marker都完全一致，所選用的熒光素種類一樣，但是搭配不一樣。那么我們看看同一個樣本，最后各個細胞亞群的結果一樣嗎？
 
方案1與方案2，CD4+CD25+ 的百分比接近（A與C比較），可是CD8+CD69+的百分比卻相差很多（C與D比較）。

造成這種原因其實就是我們平時說到到spreading現象。
 
Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315.

如果要優化流式染色方案中，由spreading現象產生的分辨率降低，我們可以使用SWOFF方法。通過如下流程，就可以很快找出究竟是由于那個通道的配色不合理，導致分辨能力下降。
 
在不同的檢測平臺，元件的光電轉化效率會直接影響儀器總體分辨率。
 
不僅如此，科技的進步帶來的還有更小的spreading現象，這使得配色也更加的輕松，結果也更加的準確。
 
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