Pfizer演講現場（BPI US West展會）^[1]

 
Genentech則開發了單一位點多質粒順序整合技術，成功實現了一個knob-into-hole雙抗的11g/L高表達；AbbVie和MSD的聯合分析顯示，傳統細胞株開發平均耗時24-28周，而定點整合技術可縮短70%以上時間。

Genentech演講現場（BPI US West展會）^[1]

 
國內也有一些定點整合平臺，如大灣生物AlfaCell平臺已與鼎康生物CDMO平臺深度整合，為全球客戶提供全流程加速服務；博安生物則在2024年10月推出了BA-Fastcell^®平臺^[2]。

技術革新：智能定點整合的本質突破

智能定點整合技術（Intelligent Site-Specific Integration，SSI）是基因編輯技術、人工智能算法與自動化設備的完美融合。與傳統隨機整合（RTI）相比，它實現了從“盲目撒網”到“精準投放”的根本轉變。

SSI帶來的變革是全方位的，主要體現在四個關鍵維度：

開發速度飛躍

將傳統24-28周的周期壓縮至6周。大灣生物展示的數據顯示，從DNA轉染到獲得研究細胞庫（RCB）僅需1.5個月。深圳太力生物的服務明確承諾1.5個月內交付穩定高產單克隆。

產量質量雙升

表達量普遍達5g/L以上，是傳統方法的1.5-2倍。更值得關注的是，雙抗正確配對率突破80%，產品純度可達98.8%。穩定性也顯著提升，達到100%穩定性傳遞。

成本大幅降低

僅用“1塊96孔板”即可完成單克隆篩選，避免大量重復工作。Pfizer等企業的實踐表明，定點整合技術可減少30%以上的開發成本。

監管路徑優化

均一性極高的細胞池獲得監管機構認可，成為IND時間線突破的新窗口。在BPI Asia 2024會議上，專家指出定點整合細胞株的數據一致性顯著簡化了審批流程。

SSI核心技術采用兩步走策略：

第一步：熒光宿主細胞構建與篩選

利用CRISPR-Cas9等基因編輯工具，在CHO細胞基因組中篩選高轉錄活性區域，插入包含熒光蛋白（如GFP）及重組酶識別位點（如BxB1 attP位點）作為“著陸墊”（landing pad）。此階段需篩選獲得熒光均一、生長穩健的單克隆宿主細胞。

第二步：目的基因精準整合與篩選

將包含目標基因（如抗體序列）和同源重組臂的表達載體導入宿主細胞，利用重組酶介導的位點特異性重組，將目標基因精準置換熒光標記。成功整合的細胞會失去熒光信號，成為“無熒光轉化子”。此階段需篩選出成功整合的無熒光的陽性克隆。

Cytena單細胞打印機在智能定點整合技術中的應用

宿主細胞篩選階段

基于熒光強度高效分選陽性宿主細胞，溫和的噴墨技術確保細胞活力。

目的基因整合后細胞篩選階段

目的基因整合后細胞篩選階段：在一群熒光細胞中反向精準分選無熒光細胞（即成功整合的細胞），其噴嘴圖像可提供單細胞來源的證據，單細胞率>95%。

Cytena設備的獨特優勢在于：分選溫和、快速、單細胞率高，熒光和非熒光細胞都能高效分選、使用無菌一次性墨盒杜絕交叉污染、結合成像設備可提供完整的克隆生長追蹤報告，完全滿足FDA單克隆源性要求。

智能定點整合單克隆篩選流程圖

 
站在生物制藥工業化的轉折點上，智能定點整合技術代表的不僅是效率提升，更是一種研發范式的根本轉變——從隨機試錯走向理性設計，從人工操作邁向智能自動化。

然而，一個不可忽視的現實是：市場上定制一個采用智能定點整合技術開發的優質細胞株，價格往往高達上千萬人民幣。這對于許多研發管線豐富、項目迭代快的生物技術公司，尤其是處于發展關鍵期的Biotech而言，無疑是一筆沉重的負擔，讓不少企業望而卻步。這高昂的“入場券”，反而點燃了另一股燎原之火——越來越多的企業不再滿足于“購買服務”，而是開始戰略性“投資未來”，著手自主組建智能定點整合技術平臺！

自主平臺的構建離不開關鍵設備的投入，Cytena單細胞打印機是平臺的核心硬件，貫穿宿主細胞篩選和目的基因整合細胞篩選兩大關鍵步驟，確保高效率、高活力、合規的單克隆分離。
 

參考資料：
【1】筆者親歷丨定點整合殺瘋了的BPI US West現場
【2】博安生物定點整合細胞株開發平臺BA-Fastcell®亮相BPI Asia 2024