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通過微流控技術高效、可放大的制備核酸脂質納米粒

瀏覽次數:1039 發布日期:2021-6-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
在過去的一年里,隨著全球范圍內眾多研究者們對mRNA疫苗的廣泛關注使得mRNA疫苗、核酸藥物等一些原本比較“生僻”的詞匯獲得了更多的曝光度。人們愈發發現原本應用于罕見病、腫瘤等疾病個性化治療的核酸藥物所具有的無限潛能,其眾多優點使得越來越多的人們意識到了下一個藥物新時代可能正悄然走來。

而目前的mRNA疫苗、核酸藥物多是采用脂質納米粒(LNP)來實現對mRNA等核酸分子的遞送的,目前輝瑞、Moderna等上市的mRNA新冠疫苗以及最早的RNA類藥物onpattro都是采用了脂質納米粒來遞送各自的核酸藥物,也是目前最受大家認可,研究使用最廣泛的遞送體系。與其他遞送材料相比,其包封效果、體內外表達效果、體內安全性等多方面都更具優勢。這也使得制備得到良好結果、可靠的脂質納米粒成為了一項重要工作。

目前常用的脂質納米粒制備方法主要有薄膜水化法、擠出法、均質法等。但是最適合的技術還是采用微流控混合技術來制備核酸脂質納米粒,該方法相對簡便快速,條件溫和,同時容易實現生產放大。

如圖1所示,通過不同生產規模的微流控機器,可以較好的實現mRNA-LNP的良好制備,其結果一致性良好。粒徑結果合適,且具有極低的PDI值,證實其分散性較好,并且包封效果可達90%以上。這些良好的表征結果正是眾多研究者們所期待看到的數據。
 

圖1. 不同生產規模的微流控機器在不同參數下可以得到一致性良好的結果
 

此外,在體內實驗中也可以進一步驗證其效果,如圖2、3所示。通過制備包載了EPO-mRNA的LNP(注:EPO,Erythropoietin,促紅細胞生成素),經靜脈注射給藥后,檢測小鼠血清中EPO蛋白表達量,可發現相較于空白組明顯的EPO蛋白表達提升,并且在不同規模機器間表達水平也比較一致。并在7天后,檢測其血細胞容積,也可發現明顯的生理指標提升。
 

111圖2. 給藥EPO-mRNA LNP后小鼠血清內EPO蛋白表達量
 

圖3. 給藥EPO-mRNA LNP7天后小鼠血細胞容積量的變化

通過這些良好的體外表征以及體內表達結果可以發現,采用微流控技術制備的mRNA-LNP的確十分可靠,并且在不同生產規模間實現了一致性的結果,讓更多研究者們有理由相信這一技術在mRNA疫苗、核酸藥物領域的強大實力。

納米藥物制備系統

應用范圍:


 

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