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檢測細胞增殖需要使用的儀器與試劑清單

瀏覽次數:1518 發布日期:2020-6-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
許多小伙伴不知道自己檢測細胞增殖的時候究竟該檢測什么?使用哪些試劑?今天,百螢將總結的可以測量細胞增殖的方法、試劑、適用儀器等分享給大家。

細胞增殖可以通過測量諸如新合成的DNA、總核酸含量或細胞分裂等參數來確定(見表1)。 最簡單的方法是使用可與胺反應的細胞跟蹤指示劑(例如CytoTell 染料)監視細胞分裂,這些可滲透細胞的指示劑與細胞質蛋白共價結合。由于這種共價偶聯反應,CytoTell 染料無法轉移到相鄰細胞中,并且可以在細胞中保留好幾代(最多可以觀察到9代)。隨著細胞分裂,CytoTell 染料在子細胞之間均等分布,并且每一代新細胞的熒光強度均是其親本的一半。可以使用標準的含甲醛固定劑和基于皂苷的透化緩沖液對用CytoTell 染料標記的細胞進行固定和透化,以進行進一步的細胞內分析。

表1.用于檢測細胞增殖的試劑和檢測列表。

檢測類型 原理 試劑/測定 儀器

檢測細胞分裂

使用與細胞質蛋白結合的可滲透細胞的染料。(隨著細胞分裂,染料被轉移到子細胞。新一代細胞的熒光強度是其親本的一半。)

CytoTell 染料

熒光酶標儀,熒光顯微鏡或流式細胞儀

CytoTrace 染料

ReadiUse CFSE

檢測新合成的DNA

在細胞周期的S期將修飾的核苷酸摻入新合成的DNA中。一旦摻入,這些核苷類似物就可以用作細胞周期和增殖標記物,可以使用標記的探針進行檢測以鑒定增殖細胞。

Bucculite dT摻入細胞增殖熒光成像試劑盒

熒光顯微鏡

BrdU  (需要酶或熒光團標記的抗BrdU抗體)

可適用于比色,熒光或化學發光儀器

檢測總核酸含量

使用可滲透細胞的核酸染色劑,該試劑能展現出與DNA質量成比例的發射信號。然后對染色的群體進行流式細胞術分析,以生成DNA直方圖,觀察細胞周期每個階段中細胞的百分比。

Cell Meter 熒光活細胞周期檢測

流式細胞儀

Cell Meter 熒光固定細胞周期檢測

核紫 LCS1 活細胞染料

Hoechst 33258,Hoechst 33342  和  DAPI


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標簽: 細胞增殖
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