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輕松解決細胞增殖的檢測方法

瀏覽次數:1843 發布日期:2020-1-10  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

無論單細胞還是多細胞都是以細胞分裂的方式產生新的細胞,進行增殖,用來補充體內衰老或死亡的細胞。

 

細胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU檢測方法是最新的細胞增殖檢測方法。

 

①試劑盒檢測細胞代謝活性(基于mtt、cck-8等)

 

mtt(噻唑藍):通過添加四咪唑鹽到細胞中可進行線粒體內酶代謝活性的測定。活細胞能將四咪唑鹽(如mtt、xtt、wst-1)還原成藍紫色的甲瓚或甲瓚鹽(formazan),可通過分光光度計或酶標儀進行檢測。

 

ScienCell MTT檢測試劑盒


MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲臜,用酶聯免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟.

 

cell counting kit╟8 (cck-8)中的wst-8被細胞內脫氫酶生物還原后生成的橙色甲舎染料能夠溶解在組織培養 基中,生成的甲舎量與活細胞數量成正比。該試劑盒可適用于96孔板培養的貼壁或懸浮細胞。


dna的合成的檢測(基于brdu的免疫法或edu的點擊化學法),可通過體內成像、微孔板或流式細胞術檢測 等多種技術進行細胞示蹤。

 

dna的新組裝合成是細胞生長的必要條件,故經常被用來進行細胞增殖、細胞活力及凋亡的檢測。brdu及edu,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,能摻入增殖細胞的dna中,可通過對brdu及edu的檢測,從而對dna的合 成量進行測定。

     

 edu(5-ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(t)滲 入正在復制的dna分子中,通過基于edu與apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞dna復制活性,適用于細 胞增殖、細胞分化、生長與發育、dna修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行sirna、mirna、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。

發布者:上海中喬新舟生物科技有限公司
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標簽: 細胞增殖
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