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ELISpot實(shí)驗(yàn)操作流程介紹

瀏覽次數(shù):6589 發(fā)布日期:2014-4-23  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

 

ELISPOT全名為酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè),英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(即ELISA技術(shù)),能夠在單細(xì)胞水平檢測(cè)細(xì)胞因子的分泌情況。其技術(shù)原理,一句話(huà)概括就是:用抗體捕獲培養(yǎng)中的細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子,并以酶聯(lián)斑點(diǎn)顯色的方式將其表現(xiàn)出來(lái)。

將細(xì)胞因子特異性單克隆抗體包被于乙醇處理過(guò)的PVDF膜板上具體板子處理和包被方法請(qǐng)參考
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/plate-coating-guide

 

將細(xì)胞加入到酶標(biāo)孔中不同組加不同的刺激劑或者不加刺激劑 具體細(xì)胞處理方法請(qǐng)參考
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/cell-handling

 

細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子與包被抗體結(jié)合

 

將多余細(xì)胞除去并洗板后將生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體加入到酶標(biāo)孔中

加入連霉親和素標(biāo)記的酶偶聯(lián)物

加入底物
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/enzymes-substrates/enzyme-conjugates

使用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)讀板儀讀取斑點(diǎn)并分析信息來(lái)源
https://www.mabtech.com/knowledge-center/assay-principles/elispot-assay-principle/elispot-step-step

 閱讀原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014040021.html

發(fā)布者:杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司
聯(lián)系電話(huà):4006721600
E-mail:network@liankebio.com

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