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活性GLP-1(7-36)特異性酶免試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):1897 發(fā)布日期:2011-7-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

活性GLP-17-36)特異性酶免試劑盒


【預(yù)期用途】

該高靈敏度ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是專門用來定量檢測血清樣本中的胰高血糖素樣肽-17-36[GLP-11-36]的濃度。哺乳動(dòng)物中的GLP-1肽鏈的基本氨基酸序列完全相同,如:小鼠、大鼠、豬、狗、猴、人等。該試劑盒僅適用于科學(xué)研究。

 

【實(shí)驗(yàn)原理】

這個(gè)ELISA的設(shè)計(jì),研發(fā)和生產(chǎn)的目的是對血漿樣品中的活性GLP-17-36)進(jìn)行定量檢測。該試劑盒是基于運(yùn)用兩個(gè)GLP-1(7-36)特異性抗體分別與兩個(gè)位點(diǎn)結(jié)合的“雙位點(diǎn)夾心”技術(shù)。

將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、和待測樣品加入鏈霉親和素包被的微孔板中。隨后,將生物素偶聯(lián)的的GLP-17-36)特異抗體和HRP標(biāo)記的GLP-1(7-36)特異抗體混合物添加到各個(gè)孔中。經(jīng)過第一個(gè)保溫孵育期后,形成了“鏈霉親和素-生物素抗體- GLP-17-36-HRP標(biāo)記抗體”的“雙位點(diǎn)夾心”結(jié)構(gòu),該復(fù)合體被微孔板的內(nèi)壁吸附住。游離的HRP標(biāo)記抗體和緩沖基質(zhì)則在洗滌過程中被沖走。微孔板加入過氧化物酶基質(zhì)(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺,TMB)并經(jīng)過一段時(shí)間的反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀測量吸光度。微孔板內(nèi)壁的免疫復(fù)合體的酶活性與樣本中的GLP-17-36)濃度成正比。

 

 

簡要實(shí)驗(yàn)步驟:

 

  • 在各孔中添加100µL的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣本;
  • 在各孔中添加100µL抗體混合物;
  • 2-8靜置培養(yǎng)20-24小時(shí);
  • 用稀釋洗滌緩沖液洗凈條帶;
  • 各孔中添加200 µLTMB基質(zhì);
  • 室溫下靜置20分鐘;
  • 添加50 µL終止液;

標(biāo)簽: GLP-1
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