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蘇木精-伊紅(HE)染色

瀏覽次數(shù):4264 發(fā)布日期:2010-9-26  來源:www.pricells.com.cn
蘇木精-伊紅(HE)染色
 
染液制備:
1.      蘇木精染液
(1)    稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中;
(2)    加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過濾即成母液;
(3)    母液可長期保存。用蒸餾水以1:20稀釋母液即成工作液。工作液也較長時間儲存,但每次染色前宜過濾,去除氧化膜;
2.      伊紅染液
伊紅有醇溶性與水溶性之分。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液;
 
染色步驟:
1.      用37℃的溫BSS漂洗3次,每次20s—1min;
2.      用中性福爾馬林固定30min;
3.      用蒸餾水漂洗1次,再用蒸餾水稀釋的蘇木精液(1/20)染10min;
4.      先用自來水沖洗幾次,而后置入1% NaHCO3液中漂洗至藍紫色;
5.      在放入伊紅水溶液中染30s—1min;
6.      用蒸餾水沖洗,迅速通過丙酮2次,每次3—5min;
7.      通過2:1丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
8.      通過1:2丙酮/二甲苯3次,每次1—2min;
9.      放入純二甲苯5—10min,用光學樹脂封片后觀察;
10.    把蓋片置載物玻片上,令小蓋片細胞面向上,用樹膠封存,再覆以較大蓋片;
 
結(jié)果:
原代細胞核染成紅色,胞質(zhì)染成藍紫色;
 
發(fā)布者:武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司
聯(lián)系電話:027-87490190
E-mail:service@pricells.com.cn

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