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正常滑膜細胞原代培養

瀏覽次數:2677 發布日期:2010-9-8  來源:www.pricells.com.cn

正常滑膜細胞原代培養

實驗材料:

1. 實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;

2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;

3. 培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;

實驗方法:

1. 將大鼠處死后,用75%酒精消毒;

2. 用手術剪剖開其四肢皮膚與肌肉,暴露長骨兩端的關節,取出關節面滑膜組織置于盛有緩沖液的培養皿中;

3. 剔除滑膜組織外層結構及周邊軟骨組織,用緩沖液洗2—3次;

4. 將滑膜組織置于盛有少量小牛血清的培養皿中,剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植塊;

5. 將制備的植塊接種到螺旋口培養瓶中。反轉培養瓶,使植有組織塊的一面朝上,加入培養液,蓋好瓶蓋。將培養瓶放入含5%CO2的培養箱中,在37℃條件下進行培養;

6. 培養4h后,組織塊較牢黏附于瓶底時,再輕輕反轉培養瓶,繼續培養;

7. 培養3d后換培養液;

發布者:武漢原生原代生物醫藥科技有限公司
聯系電話:027-87490190
E-mail:service@pricells.com.cn

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