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實(shí)驗(yàn)分享:一種常用于建立帕金森病亞急性模型的方法及后續(xù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

瀏覽次數(shù):442 發(fā)布日期:2025-6-18  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)


帕金森病(Parkinson’s disease, PD)作為全球第二大神經(jīng)退行性疾病,其核心病理特征——黑質(zhì)和紋狀體中多巴胺(Dopamine,DA)能神經(jīng)元進(jìn)行性丟失和α-突觸核蛋白異常聚集形成路易小體(Lewy bodies, LBs)[1]——至今仍是科學(xué)界攻堅(jiān)的難點(diǎn)。構(gòu)建高度模擬人類(lèi)PD病理的動(dòng)物與細(xì)胞模型,不僅是解析疾病機(jī)制的核心工具,更是推動(dòng)精準(zhǔn)療法開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵橋梁。

本篇文章為大家介紹了一種常用于建立PD的亞急性模型的方法及后續(xù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),為相關(guān)實(shí)驗(yàn)提供參考與助力。

模型特點(diǎn)
MPTP是一種作用于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)毒素,對(duì)靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物、貓、鼠、狗、羊、蛙、金魚(yú)等多種動(dòng)物均具有毒性作用。

小鼠對(duì)MPTP的敏感性存在品系和年齡的差異,相比之下C57BL/6小鼠對(duì)MPTP最為敏感,老年鼠比青年鼠更敏感。

PD亞急性模型是目前所建立的最能反應(yīng)人類(lèi)PD特征的動(dòng)物模型,目前被廣泛用于PD發(fā)病機(jī)制、診斷及治療方面的研究工作中,為PD的細(xì)胞死亡機(jī)制研究提供線(xiàn)索。

造模方法:
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:C57 雄性 10~12周齡小鼠
藥物:1-甲基-4 苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,  MPTP)
濃度:6mg/mL(溶劑:生理鹽水)
連續(xù)進(jìn)行7天的腹腔注射,按照小鼠體重30mg/kg給藥,建議給藥前稱(chēng)重,避免藥物劑量影響造模結(jié)果(過(guò)多會(huì)導(dǎo)致小鼠死亡,過(guò)少會(huì)導(dǎo)致造模失敗)

后續(xù)實(shí)驗(yàn)
行為學(xué)
① 給藥結(jié)束后,對(duì)小鼠進(jìn)行曠場(chǎng)、轉(zhuǎn)棒、爬桿、抓力等行為學(xué)實(shí)驗(yàn),評(píng)價(jià)PD小鼠的運(yùn)動(dòng)及平衡協(xié)調(diào)能力。

藥效學(xué)

Tip
高炎癥水平是退行性神經(jīng)疾病的主要必要條件[2],因此通過(guò)檢測(cè)IL-1β、TNF-α等炎性因子含量驗(yàn)證PD造模的效果;

TH是DA生物合成的限速酶[3],其在黑質(zhì)中的變化會(huì)直接影響到DA的生物合成,可以說(shuō)TH的表達(dá)量和DA的變化呈正相關(guān)。因此,檢測(cè)黑質(zhì)和紋狀體中TH含量,可以判斷DA缺失情況,從而評(píng)價(jià)PD造模效果。

特別說(shuō)明:MPTP為劇毒,現(xiàn)用現(xiàn)配,實(shí)驗(yàn)操作人員需要做好個(gè)人防護(hù)工作。

參考文獻(xiàn):
[1]  Lu J S, Chen Q Y, Chen X, et al. Cellular and synaptic mechanisms for Parkinson's disease
related chronic pain[J]. Molecular Pain, 2021, 17: 1-11.
[2] Shabab T, Khanabdali R, Moghadamtousi S Z, et al. Neuroinflammation pathways: A general
review[J]. International Journal of Neuroscience, 2017, 127(7): 624-633.
[3] Nagatsu T, Nakashima A, Ichinose H, et al. Human tyrosine hydroxylase in Parkinson's
disease and in related disorders[J]. Journal of Neural Transmission, 2019, 126(4): 397-409.

發(fā)布者:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司
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