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自動高通量法測定杉木對多回線蟲的殺蟲活性

瀏覽次數(shù):361 發(fā)布日期:2025-5-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負

Antihelminthic Activity of Lophira Lanceolata on Heligmosomoides polygyrus Using an Automated High-Throughput Method” 發(fā)表于Journal of Tropical Medicine,研究發(fā)現(xiàn)披針葉羅庚梅提取物對多形螺旋線蟲有抗蠕蟲活性,但需進一步研究其安全性和毒性。

1.研究背景:蠕蟲病在非洲發(fā)展中國家流行,因缺乏關(guān)注和資金被列為被忽視的熱帶病。現(xiàn)有合成驅(qū)蟲藥出現(xiàn)耐藥性、有副作用且不易獲取,喀麥隆當(dāng)?shù)爻S貌菟幹委熑湎x病。披針葉羅庚梅在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中應(yīng)用廣泛,本研究用自動化高通量方法評估其抗蠕蟲活性。

2.材料和方法

實驗材料:多形螺旋線蟲感染性三期幼蟲由英國愛丁堡大學(xué)提供;披針葉羅庚梅葉子采自喀麥隆西部,經(jīng)國家植物標本館鑒定并編號;制備水提物和醇提物;通過浮選技術(shù)收集和濃縮蟲卵,培養(yǎng)蟲卵獲取 L1 和 L2 幼蟲。

實驗方法:采用自動化高通量設(shè)備 WMicrotracker,進行蟲卵孵化試驗和幼蟲運動性測定評估提取物抗蠕蟲活性,同時對提取物進行植物化學(xué)成分篩選。研究遵循倫理準則,數(shù)據(jù)用 GraphPad Prism 8.0 分析,計算半數(shù)抑制濃度()評估抗蠕蟲效果。

3.實驗結(jié)果

水提物和醇提物對蟲卵孵化率的影響:橫坐標為提取物濃度及對照,縱坐標為蟲卵孵化率。5mg/mL 時,水提物和醇提物孵化率分別為 5.0±5.0% 和 11.66±2.8% ,蒸餾水和 1.5% DMSO 孵化率 100%。0.3125mg/mL 和 0.625mg/mL 時,醇提物孵化率較高,分別為 65±8.6% 和 76.66±15.2%,直觀展示提取物抑制蟲卵孵化效果。

蟲卵孵化的半數(shù)抑制濃度():橫坐標為濃度對數(shù)(mg/mL),縱坐標為抑制率。醇提物IC50為1.4mg/mL ,水提物未確定,表明醇提物對蟲卵孵化抑制作用更強。

水提物和醇提物對多形螺旋線蟲 L1 幼蟲運動抑制率:橫坐標為提取物濃度及對照,縱坐標為幼蟲運動抑制率。5mg/mL 時,水提物和醇提物抑制率分別為 86.66±5.77 和 96.66±6.44 ,均接近陽性對照左旋咪唑(96.67±2.88),蒸餾水和 1.5% DMSO 抑制率 0%,顯示提取物對 L1 幼蟲運動抑制效果及濃度依賴關(guān)系。

L1 幼蟲運動的半數(shù)抑制濃度():橫坐標為濃度對數(shù)(mg/mL),縱坐標為抑制率。水提物和醇提物IC50分別為 1.85mg/mL 和 2.4mg/mL,表明醇提物對 L1 幼蟲運動抑制活性更強。

水提物和醇提物對多形螺旋線蟲 L2 幼蟲運動抑制率:橫坐標為提取物濃度及對照,縱坐標為幼蟲運動抑制率。5mg/mL 時,水提物和醇提物抑制率分別為 93.33±5.77 和 100±0.0 ,差異顯著,蒸餾水和 1.5% DMSO 無抑制作用,左旋咪唑抑制率 100%,體現(xiàn)提取物對 L2 幼蟲運動抑制效果及濃度依賴關(guān)系。

L2 幼蟲運動的半數(shù)抑制濃度():橫坐標為濃度對數(shù)(mg/mL),縱坐標為抑制率。水提物和醇提物分別為 1.08mg/mL 和 1.02mg/mL,表明醇提物對 L2 幼蟲運動抑制活性更強。

結(jié)果表明:

蟲卵孵化試驗:5mg/mL 時,水提物和醇提物顯著抑制蟲卵孵化;醇提物的為 1.4mg/mL ,水提物未確定,表明醇提物對蟲卵孵化抑制作用更強。

幼蟲運動性測定:5mg/mL 時,水提物和醇提物對 L1、L2 幼蟲運動性抑制明顯,呈濃度依賴性;L1 幼蟲中,醇提物和水提物分別為 1.85mg/mL 和 2.4mg/mL;L2 幼蟲中,二者分別為 1.02mg/mL 和 1.08mg/mL,顯示醇提物活性更高。植物化學(xué)成分篩選顯示水提物化學(xué)成分種類更多。

4.研究討論:醇提物對蟲卵孵化抑制作用可能與提取物中的皂苷有關(guān),其抑制蟲卵孵化結(jié)構(gòu)發(fā)育或影響蟲卵滲透壓。提取物對 L1、L2 幼蟲有殺幼蟲活性,醇提物效果更佳,L1 幼蟲更敏感。提取物的抗蠕蟲特性可能源于其所含的多種次生代謝物。

5.研究結(jié)論:本研究科學(xué)驗證了披針葉羅庚梅在喀麥隆民間醫(yī)學(xué)中對抗蠕蟲的作用,但需進一步開展體內(nèi)實驗和毒性測試,以評估其安全性,確定能否作為抗寄生蟲藥物。

WMicrotracker小動物活動力分析系統(tǒng),為測試培養(yǎng)于液體中的小模式動物而優(yōu)化設(shè)計,在24、48、96或384孔板中自動量化小模式動物的行為活動。已成功證明了可應(yīng)用于例如線蟲(C.elegans)、斑馬魚幼蟲(Zebrafish larvae)和其它昆蟲幼蟲(insects larvae),應(yīng)用于化合物篩選、RNAi/嗎-啉試驗、轉(zhuǎn)基因試驗、長周期測試或自定義實驗;毒性測試、麻痹試驗、代謝試驗、疾病模型、突觸調(diào)節(jié)器、抗逆性、健康期(衰老)、趨化性、卵孵化等實驗。
 

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