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凍存后細胞復蘇的步驟及注意事項

瀏覽次數:709 發布日期:2025-1-10  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
真核細胞通常懸浮在帶有血清和冷凍劑的培養基內,保存在-196°C 的液氮中。如果是商業訂購的,通常儲存在用干冰包裹的凍存管中。所以凍存后的細胞必須快速解凍后立即培養,以獲得最大的生存能力,為了除去凍存時的添加劑, 24 小時后要更換培養基。

一、材料
培養基, 37’C 預熱
培養瓶
裝有70 %乙醇的燒杯
1ml 、10ml 的移液管、移液器及移液頭

二、步驟
把凍存細胞的管子在37’C 的水浴融化,快速搖動, 1分鐘內使管內的細胞融化。
把融化的管子浸入裝有70 %乙醇的燒杯內,整個實驗在超凈臺內進行。
小心打開凍存管,不要讓乙醇浸入管內。
將凍存管內的細胞轉移到培養瓶中,并立即加入預熱的培養基。
蓋好培養瓶的蓋子,培養24 小時。
用新培養基替換老培養基。
繼續培養2~3 天或按說明書上的建議進行操作。

三、溫馨提示
1.融解的細胞必須馬上培養,如果來不及培養,就保存在液氮中。
2.細胞通常凍存為1 ml 的體積,加入新的培養基至10ml 。
3.可以在融化了凍存細胞后,把細胞離心下來,并用新鮮的培養基重新懸浮細胞,這種做法只適用于那些對凍存劑敏感的細胞,或者笫二天因為有事不能更換新培養基的情況。
發布者:上海雅吉生物科技有限公司
聯系電話:021-34661276
E-mail:58268971@qq.com

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