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逐典Chaselection-重組胰蛋白酶使用常見問題答疑

瀏覽次數:1010 發布日期:2023-12-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

Q1:逐典重組胰蛋白酶配置是否需要過濾?

A1:需要使用0.22μm濾膜除菌過濾,這個在母液配置和工作液(即稀釋后)的配置中都是需要的。


Q2:逐典重組胰酶產品是否是無菌產品?

A2:不是無菌產品,產品COA中是微生物限度標準為100CFU,所以在配置使用前需要進行無菌過濾。


Q3:逐典重組胰蛋白酶的配置有哪些環節?分幾步?

A3:重組胰酶從干粉到能直接使用的工作液需要兩大環節。第一步:需要配置成低PH的母液,除菌過濾;第二步:再進行中性緩沖液稀釋,過濾除菌后就能直接使用了。


Q4:逐典重組胰酶的主要優點是那些?

A4:非動物來源、GMP環境生產、高酶活、高穩定性。


Q5:逐典重組胰酶的建議使用濃度是多少?

A5:配置母液的濃度是10 mg/ml,配置工作液濃度是0.5 mg/ml。


Q6:逐典重組胰酶產品如何保存?干粉?母液?工作液?

A6:一般來說,我們的干粉產品 -20℃保存 2年沒有問題, 配成母液-20℃保存 1年沒有問題,工作液的話-20℃保存 1-3個月沒有問題,臨時用放在4℃可保存一周內,但還是建議客戶現用現配。


Q7:消化細胞的胰酶是不是濃度越高越好?

A7:不是的,一般來說消化細胞會有一個最佳胰酶濃度,達到最適濃度后濃度升高會傷害細胞。


Q8:細胞消化時間長是不是意味著胰酶產品性能不行?

A8:一般的細胞消化時間3-5min都是很正常的,難消化的細胞10-15min也是存在的。 細胞消化時間長短不能完全決定產品性能,產品的比活、活性、級別、生產技術、以及質量標準等因素都是評判產品性能的條件。


Q9:如何控制胰酶消化時間?

A9:不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關。


Q10:新細胞如何使用胰酶消化?

A10:消化對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄最佳消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。


Q11:使用胰蛋白酶的時候加入EDTA是為什么?

A11: EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前,用EDTA清洗細胞,以消除來自培養基中所有的二價離子。

發布者:上海瑋馳儀器有限公司
聯系電話:18521301252
E-mail:xiaojing.su@weichilab.com

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