九叔归来3魁蛊婴在线观看_男人躁女人到高潮AV_香港成人论坛_亚洲精品久久久久久偷窥_夜来香成人网_亚洲制服 视频在线观看_无毒黄站_国产传媒18精品A片一区_麻花豆传媒剧国产MV在线观看_东北60岁熟女露脸在线_国产高清视频在线观看97_一道本视频一二三区_yellow免费播放在线观看_浪漫樱花动漫在线观看官网_高清AV熟女一区_天堂在线www_亚洲第一成年人网站_黄色在线免费观看_av女优快播_久久精品99国产精品日本

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 如何降低血清蛋白分離的成本

如何降低血清蛋白分離的成本

瀏覽次數:1343 發布日期:2023-3-10  來源:賽多利斯
患者樣本中存在的一些生物分子能夠為疾病診斷提供關鍵的檢測指標,例如疾病代謝物和蛋白質標記物。現有的分離方法通常采用沉淀法,費時昂貴且要條件優化。本文中,我們通過使用 NMR 和 Off-Gel 方法來進行評估,展示了如何通過超濾快速、精確、高效地分離血清中生物分子。
 
 
Download


下載文檔

 
下載本篇《Vivaspin® Turbo 4 PES: 一種分離疾病代謝物和蛋白質的經濟方法》應用說明,了解超濾系統如何在經濟效益,具有同樣的有效性質,簡單易操作的前提下完成該過程。

目前,人們普遍采用多重親和去除系統(Multiple Affinity Removal System, MARS)從人血清、血漿和其他生物液體中分離高豐度蛋白質(白蛋白、IgG、抗胰蛋白酶、IgA、轉鐵蛋白和結合珠蛋白)。去除這些高豐度蛋白質可以有效地擴大動態范圍,從而改善血清樣本的LC/MS和電泳結果。但是,使用該系統會給用戶帶來高昂的成本(4×w.r.t.超濾)。

我們通過超濾的方式,以蛋白質的大小和結構為基礎,在驅動力(通常由離心或壓力條件產生)下將樣品通過膜分離。
 
 
具體步驟如下

1 濃縮管制備

用 0.1NHCl沖洗Vivaspin® Turbo 4,重復沖洗 3 到 4 次。

2 樣品采集、超濾和分析
  • 從患者身上抽取血樣并提取血清
  • 使用 Vivaspin® Turbo 4,50kda MWCO PES(4000g,7min)高豐度血清蛋白
  • 使用 Vivaspin® Turbo 4,3kDa MWCO PES 濃縮濾液(4000g,7min)
  • 濃縮物的Off-Gel進行區帶分離分離(蛋白質>3kDa)
  • 超濾透過液的核磁共振(代謝產物<3kDa)

以上步驟即可實現蛋白質從代謝物中分離,但是需要注意的是用去離子水進行預沖洗無法有效去除干擾物,因此在核磁共振圖譜中觀察到雜質峰(圖1)。因此使用0.1NHCl溶液進行預沖洗(一個濃縮管的預沖洗量為12 ~ 14 mL,是Vivaspin® Turbo 4PES的 3 ~ 4 倍)。
 

圖1. 核磁共振圖譜
 
 
結論

通過Off-Gel分離對濃縮物進行分析(圖2),含有小代謝物的濾液則通過核磁共振進行分析(圖3)。因此超濾方式是簡單高效的,對一個樣本的分析成本估計會是MARS的四分之一。
 
 
(左)圖2. 對健康個體(頂部)和患病個體(底部)的 血清中蛋白質進行的Off-Gel分離分析
(右)圖3. 對健康個體(頂部)和患病個體(底部)血清中代謝物進行的核磁共振分析
 
 
客戶感言

基于超濾的蛋白質分離法是一種非常有用的方法,無需任何化學處理即可獲得所需的蛋白質。它耗時很少,經濟耐用。獲得的結果也可重現。可將其用于靶向或非靶向的方法,從而去除所需的蛋白質和小分子量分子。與使用MARS系統的步驟相比,該方法節省了很多成本。我感謝賽多利斯團隊在正確的時間為我的應用提供了超濾濃縮管,從而幫助我提高了效率。

下載完整文獻
發布者:德國賽多利斯集團
聯系電話:實驗室產品與服務事業部:400 920 9889 / 生物工藝解決方案事業部:400 680 1870
E-mail:info.cn@sartorius.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 芜湖县| 公安县| 鲁甸县| 沁源县| 高邮市| 苍南县| 沧州市| 白沙| 比如县| 邵阳市| 进贤县| 江阴市| 通道| 崇州市| 建德市| 克拉玛依市| 湘阴县| 龙泉市| 秦皇岛市| 和田县| 新蔡县| 通榆县| 曲靖市| 铁力市| 玉林市| 北票市| 凌云县| 大厂| 舞钢市| 彰化县| 沛县| 隆昌县| 大同市| 永新县| 大理市| 迁安市| 枞阳县| 宜都市| 白水县| 满洲里市| 竹溪县|