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HEK293和HEK293t兩種細(xì)胞系的相同點(diǎn)和區(qū)別

瀏覽次數(shù):2557 發(fā)布日期:2023-2-20  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
HEK細(xì)胞系是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常見的一種細(xì)胞系,那么 HEK293和293t細(xì)胞有區(qū)別嗎?

什么是 HEK293?
HEK293 是一種永生化細(xì)胞系,來(lái)源于人胚胎腎臟,用剪切的人腺病毒 5 型 DNA 轉(zhuǎn)染以產(chǎn)生許多重組蛋白。HEK293 剛開始是由荷蘭生物學(xué)家 Alex Van der Eb 于 1973 年從人類腎臟細(xì)胞中分離出來(lái)的。這些細(xì)胞是在女性胎兒的組織培養(yǎng)物中生長(zhǎng)的。后來(lái),Van der Eb 實(shí)驗(yàn)室的博士后研究員 Frank Graham 對(duì)它們進(jìn)行了剪切的人類腺病毒 5 型 DNA 轉(zhuǎn)染。該細(xì)胞系之所以被命名為HEK293,是因?yàn)檫@是弗蘭克的第293次實(shí)驗(yàn)。

將腺病毒基因整合到 HEK 細(xì)胞基因組中,使這些細(xì)胞能夠非常有效地產(chǎn)生大量重組蛋白。此外,腺病毒載體含有CMV啟動(dòng)子區(qū);因此,它進(jìn)一步提高了效率。該細(xì)胞系已被用作基因表達(dá)研究的宿主。

什么是 HEK293t?
HEK293t是源自HEK293原始細(xì)胞系的子代細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染攜帶SV40復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒載體,產(chǎn)生大量重組蛋白。HEK293t 是一種表達(dá) SV40 大 T 抗原突變體的人類細(xì)胞系。HEK293t 是在斯坦福大學(xué) Michele Carlos 的實(shí)驗(yàn)室通過(guò)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 HEK29E 細(xì)胞系和編碼 SV40 大 T 抗原的溫度敏感突變體的質(zhì)粒而創(chuàng)建的。它初被稱為 293/tsA1609neo。這是因?yàn)檗D(zhuǎn)染用于創(chuàng)建賦予新霉素抗性和 SV40 大 T 抗原的 tsA 1609 等位基因表達(dá)的細(xì)胞系。

由于 SV40 大 T 抗原的突變版本的表達(dá),具有 SV 40 復(fù)制起點(diǎn)的轉(zhuǎn)染質(zhì)粒可以大大增加重組蛋白的量。該細(xì)胞系通常用于生物技術(shù)行業(yè)的蛋白質(zhì)表達(dá)和重組逆轉(zhuǎn)錄病毒的生產(chǎn)。

HEK293 和 HEK293t 的相同之處
轉(zhuǎn)染通常被定義為將外來(lái)DNA和RNA引入細(xì)胞以影響其基因型和表型的過(guò)程。通過(guò)各種生物、化學(xué)和物理方法引入外來(lái)核酸可以改變細(xì)胞的特性。這允許在細(xì)胞環(huán)境中研究基因功能和蛋白質(zhì)表達(dá)。

HEK293 和 HEK293t 是兩種細(xì)胞系,由于它們具有轉(zhuǎn)染傾向,多年來(lái)在細(xì)胞生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。

HEK293 和 HEK293t 是兩種細(xì)胞系,由于它們具有轉(zhuǎn)染傾向,因此被廣泛用于細(xì)胞生物學(xué)研究,兩者的相同之處在于
兩種細(xì)胞系都是實(shí)驗(yàn)室衍生的。
這些細(xì)胞系可以大大增加重組蛋白的產(chǎn)量。
它們是通過(guò)用質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染胚胎人腎細(xì)胞制成的。
(下圖為:293T細(xì)胞)
 

HEK293 和 HEK293t 的區(qū)別
HEK293 是一種永生化細(xì)胞系,來(lái)源于人類胚胎腎臟,該腎臟被剪切的人類腺病毒 5 型 DNA 轉(zhuǎn)染。相反,HEK293t 是源自 HEK293 原始細(xì)胞系的子細(xì)胞系,該細(xì)胞系轉(zhuǎn)染了攜帶 SV40 復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒載體。因此,這是 HEK293 和 HEK293t 之間的主要區(qū)別。此外,HEK293 不表達(dá) SV40 大 T 抗原的突變版本。另一方面,HEK293t 表達(dá) SV40 大 T 抗原的突變版本。
     
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