在樣本制備的過程中，往往會應用一些試劑（如多聚甲醛、福爾馬林等）對新鮮組織進行處理，這個過程可能導致抗原位點被封閉，為了避免影響后續免疫染色的效果，我們需要先對切片進行抗原修復。對于石蠟切片來說，抗原修復是不可或缺的步驟，常用的方法有酶消化法和熱修復法。
 

作為最早的抗原修復方法，常用的消化酶有三：胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K。但酶的作用極易受溫度影響，如果消化不足，則無法充分暴露出抗原位點，過度的消化又會破壞組織結構，影響最后陽性信號的判讀，因此在后續的發展中，酶消化法漸漸被熱修復技術所替代，但對于個別抗原，如免疫球蛋白、補體，以及在甲醛固定、石蠟包埋的腎活檢中，酶消化法依舊不可替代。
 

抗原熱修復是采用高溫、高壓方法配合合適的抗原修復液，使得被固定液封閉的抗原位點重新暴露，提高抗體的陽性檢出率。
 

最常用的抗原修復液有兩種：檸檬酸鈉緩沖液（pH=6）、EDTA緩沖液（pH=8或9），一般來說一抗的說明書都會寫明需要選擇哪種修復液。如果說明書沒有推薦，檸檬酸鈉緩沖液能夠適配大部分的抗體，EDTA緩沖液相對修復效果更強，但陽性增強的同時也會提高非特異背景，一些比較難表達的抗體可以選擇EDTA緩沖液。
 

小愛溫馨提示，沒有哪一種抗原修復液或者修復方法能夠適配所有的抗體和樣本，最佳條件還是需要在摸索實踐中確定哦！