九叔归来3魁蛊婴在线观看_男人躁女人到高潮AV_香港成人论坛_亚洲精品久久久久久偷窥_夜来香成人网_亚洲制服 视频在线观看_无毒黄站_国产传媒18精品A片一区_麻花豆传媒剧国产MV在线观看_东北60岁熟女露脸在线_国产高清视频在线观看97_一道本视频一二三区_yellow免费播放在线观看_浪漫樱花动漫在线观看官网_高清AV熟女一区_天堂在线www_亚洲第一成年人网站_黄色在线免费观看_av女优快播_久久精品99国产精品日本

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 平行生物反應器應用:基因治療中細胞培養規模化挑戰

平行生物反應器應用:基因治療中細胞培養規模化挑戰

瀏覽次數:1393 發布日期:2022-9-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負


基因治療可以治療由遺傳缺陷引起的各種疾病,是一種有力且具備良好前景的療法。重組腺相關病毒載體(rAAV)則是治療基因遞送的首選載體。rAAV具有良好的生物安全性、無法自主復制、能夠轉導分裂和非分裂細胞等特點,被用于多項基因治療臨床試驗中。然而,實現大規模生產rAAV產品以滿足快速增長的臨床和商業需求仍然是基因治療行業的主要瓶頸。

 

瞬時轉染系統、桿狀病毒表達載體(BEV)系統、生產細胞系(PCL)系統是三大rAAV制造平臺,目前這些平臺在規模化生產階段時遇到的挑戰與細胞培養過程密不可分。在Gene therapy: challenges in cell culture scale-up中討論了基因治療行業主流生產平臺的優勢和局限性,重點關注細胞培養的放大。
 
不同平臺優勢和放大局限性

瞬時轉染(Transient transfection)是廣泛使用的制造方法之一,具有快速開發、靈活度高、可以生產多種rAAV等優勢。其工藝開發工作集中于細胞系工程、克隆篩選、質粒配置改進和工藝優化上。粘附瞬時轉染(aTT)主要用于科研小規模rAAV生產和材料的生成,將質粒替換為不同的目標基因,使用單個宿主細胞系就可以生產多個構建體,縮短篩選和開發時間。然而,aTT工藝的可拓展性和制造一致性仍存在不少挑戰。使用aTT進行rAAV生產需要大量實驗員進行操作,勞動密集程度高,同時可能導致批次間重復性差,流程難以驗證等問題。
 
懸浮瞬時轉染(sTT)能夠在攪拌罐生物反應器中放大細胞培養,同時降低液體處理的要求,近年來被認為是更理想的解決方案。有研究成功開發出高表達的細胞系并成功放大至數百升的生物反應器中。
桿狀病毒表達載體系統(Baculovirus expression vector systems)具有利于放大擴展、相較于哺乳動物細胞平臺的體積生產率更高、不含動物成分等優點。但仍存在載體蛋白比率不一致,翻譯后修飾等問題,阻礙了大規模rAAV生產的實施。

生產細胞系(Producer cell lines)系統被認為是成本低、穩定性高、可拓展的生產平臺。其主要缺點是前期獲得穩定的工程細胞系需要耗費大量時間和資源。隨著基因治療的商業化,市場將需要更高產量更低成本的產品,應運而生的則是可誘導生產細胞系(iPCL)系統。該系統利用化學誘導啟動子調控基因的表達,同時具有可拓展、穩定性高、產量高的優勢。誘導表達同時還可以減少基因表達的副作用,如細胞死亡、生產延遲等。利用該系統rAAV的生產可以分為細胞生長和病毒載體產生階段。細胞生長階段可以采用高密度細胞培養工藝來增加生物量。

有研究表明,使用小體積平行生物反應器可以借助高通量與平行性的優勢來做DOE實驗,幫助快速篩選合適培養基、微載體以及工藝參數。也有團隊通過平行生物反應器開展灌流工藝獲得了更高的單位體積產量。
 
在小規模平行反應器實驗階段獲得的參數,利用生物反應器放大計算及其相關技術,快速進行放大研究和工藝開發。

 

Minibox CloudReady云反應器可根據用戶需求增加數量幾百套上千套生物反應器,沒有數量限制,輕松實現高通量。采用先進實驗室信息管理系統(LIMS)概念、項目制管理,實現分布式控制。強大的軟件可以將所有事件從配方執行到歷史記錄,所有的操作記錄將自動收集并整合到詳細的批量報告中。開展更多實驗的同時降低實驗成本,并大幅提高了實驗室效率,讓工藝開發的平臺能力飛躍提升。

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 平利县| 犍为县| 和政县| 元朗区| 拉孜县| 凤山县| 古田县| 西乌珠穆沁旗| 绥化市| 深州市| 吐鲁番市| 中江县| 临江市| 夏河县| 民县| 通辽市| 余庆县| 沁阳市| 大厂| 四会市| 新闻| 平远县| 遵化市| 巴东县| 汉沽区| 正阳县| 临夏县| 桦南县| 陆丰市| 武功县| 镇赉县| 丹江口市| 大化| 胶南市| 佛山市| 高台县| 高碑店市| 涡阳县| 南澳县| 寻甸| 东港市|