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實驗室操作技能匯總-免疫熒光玻片如何檢測和觀察

瀏覽次數:2182 發布日期:2022-4-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

什么是免疫熒光技術?

免疫熒光技術(Immunofluorescence technique)又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。

免疫熒光方法中主要步驟:

1)冰凍切片制備                2)組織切片固定     3)血清封閉                4)一抗孵育條件

5)二抗孵育條件                6)復染                  7)封片                        8)切片清洗

熒光顯微鏡標本制作要求:

1、載玻片:載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發熒光,有時需用石英玻璃載玻片。

2、蓋玻片:蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。

3、標本:組織切片或其他標本不能太厚,如太厚激發光大部分消耗在標本下部。另外,細胞重迭或雜質掩蓋,影響判斷。

4、封裱劑:封裱劑必須無自發熒光,無色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時較亮,不易很快褪去。

5、鏡油:必須使用無熒光鏡油。

熒光玻片如何來檢測呢?

熒光顯微鏡是利用一個高發光效率的點光源,經過濾色系統發出一定波長的光(如紫外光365nm或紫藍光420nm)作為激發光、激發標本內的熒光物質發射出各種不同顏色的熒光后,再通過熒光顯微鏡來觀察。

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發布者:艾普拜生物科技(蘇州)有限公司
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