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研究級顯微鏡選型中的核心因素

瀏覽次數:1175 發布日期:2022-3-30  來源:明美

光學顯微鏡是生命科學研究實驗室的核心設備之一,它被應用于不同領域,揭示不同科學問題。本文結合顯微鏡的特點,總結選擇合適的研究級顯微鏡時應該考慮的核心因素。

使用什么樣的標本?


選擇研究級顯微鏡時需考慮的一件事是想探索的樣品類型。對于安裝在一片薄的玻璃片上的固定樣品,可以使用正置顯微鏡


活細胞需要不一樣的顯微鏡。培養細胞需要在相對較大、充滿培養基的培養容器里生存,物鏡需在樣品下方,并采用長工作距離設計,以保障物鏡不會因為達不到工作距離而無法觀察貼壁和懸浮的細胞、組織,對應地,聚光鏡需要在樣品上方,這種結構就是倒置顯微鏡。


左:在載玻片上放置固定樣品,例如:組織切片 
右:培養活細胞用的培養皿


圖2:左:正置的顯微鏡的特色是物鏡在樣本是上方,聚光鏡在樣本下方。
右:在倒置顯微鏡下這個組裝被逆轉以給用戶更多的空間增加物鏡對樣本的親近性。

哪種對比法適合你的樣品? 

大多數細胞呈透明狀,對比度低,難分辨細節。研究人員需使用各種對比增強方法來觀察。既可以用相差對比度(PH)和微分干涉對比度(DIC)操縱穿過樣本的光來添加對比度,也可用DAPI等熒光染料進行染色添加對比。    

根據對比的方法,顯微鏡需要特定的設備,如相差需要相稱環和PH物鏡;熒光顯微鏡需要特殊的激發塊,以允許正確的光波長度進出標本。


用不同對比方法拍攝的神經元系列。從左到右:明場,DIC,相稱,熒光


要怎樣的光源?

對比方法的選擇也決定了用什么光源。用于常規明場顯微鏡學的透射光照明,鹵素燈和LED照明,可支持相襯和DIC。熒光觀察需要光譜覆蓋較寬的熒光光源,比如LED熒光光源或者汞燈,氙燈,或者鹵素燈,LED熒光光源因為壽命長,方便易用,已經成為新時代主流。

是否要將結果文件化或者發布結果?    
 
  
如果你想拍攝做活細胞成像,你需要一個數碼顯微鏡相機。特別是在熒光活細胞成像的情況下,建議用一個靈敏的的相機,以盡量減少會損害細胞的激發光的總量。如明美背照式科學級sCMOS相機MSH12-BI,結合了高速率、寬動態范圍的能力,在材料和生命科學中廣泛應用,如弱光成像、熒光成像、光譜成像、近紅外NIR成像等領域。


背照式科學級sCMOS相機MSH12-BI


一個易于使用的顯微鏡系統運行的直觀的軟件,有助于讓人們快速啟動,并迅速獲得數據,簡化你的工作。如明美顯微數碼測量分析系統,軟硬件集成一體化系統,以高性能和易用性為目標,通過軟件控制相機,完成實時拍照、錄像、測量統計、實時熒光多通道合成、圖像處理等功能,支持Directshow接口攝像頭,支持中文、英文實時切換。

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來源:https://www.mshot.com/article/1393.html

發布者:廣州市明美光電技術有限公司
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