1、購買細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少的情形?

研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。

2、有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

3、血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?

血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。

4、細胞培養時能否更換胎牛血清?

首先要確定更換胎牛血清的理由，如果細胞培養無異常的話，不建議隨意更換不同品牌和來源的胎牛血清。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的來源(血源地)和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同地域和等級的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞死亡。

如果是使用的胎牛血清出現了問題，比如保存不當或操作不當導致血清成分析出、混濁、污染等情況，可以優先更換同品牌、等級、批次的血清;如果是產品質量問題更換血清品牌的話，需要用一批細胞進行預實驗才行，以保證細胞能夠正常培養。

另外在購買胎牛血清的時候要選擇正規來源和經過海關檢疫胎牛血清，非正規來源的胎牛血清有很多安全隱患，對實驗室、操作人員、細胞培養、實驗數據都有很大的影響。

5、培養細胞什么時候需要換液?

視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養基即可。

6、培養基到底要不要加抗生素?

除于特殊篩選系統中外，一般正常培養狀態下，培養基中不應添加任何抗生素。如果是沒有進行過細胞培養的新手，對無菌技術沒有信心的，或者提取的原代細胞，怕污染的，可以適量添加抗生素。抗生素本身也是有毒性的，有些抗生素的藥效濃度水平與毒效濃度水平非常接近，對細胞多少有傷害

7、培養基里的粉紅色是什么?

酚紅一般作為培養基中pH值的指標：當培養基呈中性時為紅色，呈酸性時為黃色，堿性時為紫色。另外，酚紅可以模擬類固醇激素(特別是雌激素)的作用。如果要避免類固醇反應，可以在無酚紅的培養基里進行培養

8、如何避免細胞培養過程中的污染?

主要還是考慮無菌環境，盡量做好操作臺的滅菌，別把培養基滴落在生物安全柜的入風口，別在培養箱里把培養基打翻。這兩個地方霉菌一旦滋生，那你就只能等著用甲醛熏蒸了。

紫外無法殺滅霉菌，酒精也不行，只能用甲醛熏蒸，但是一定要注意安全。復蘇的時候，水浴鍋也需要進行滅菌處理。一旦出現污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情況下，選擇扔掉。避免交叉感染，要不只能整個實驗室消毒了。

上海中喬新舟生物科技有限公司

1、原代細胞：人臍靜脈內皮細胞、人臍帶間充質干細胞、人脂肪間充質干細胞、iPS誘導多能干細胞（可提供細胞流式及免疫熒光鑒定報告，需簽訂MTA協議）。

2、培養基：原代細胞專用低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養基。

3、細胞培養試劑：胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。

4、細胞系（株）：種類豐富，已通過STR鑒定；提供細胞株完全培養基。

5、自研產品：支原體檢測/清除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。

6、技術服務：細胞熒光標記服務（GFP/RFP/LUC）、干擾/過表達穩轉株構建、細胞基因敲除、細胞系鑒定服務（STR）、原代細胞永生化、腫瘤細胞耐藥株構建、原代細胞分離等。