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期刊對Western Blot數據要求的四大要點

瀏覽次數:3316 發布日期:2020-7-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

2018年,PubMed 中共有194,262 篇蛋白相關的論文,其中有16,196(8.3%)篇用到了 WB。WB 的使用比例在過去30年中穩定在8%到9%左右,而更為現代和準確的蛋白質譜技術(MS),在過去十年中應用比例則穩定在4%,僅僅是WB的一半。四十年后的今天,WB依舊是應用率最高的蛋白質分析技術。但是重現性和穩定性的問題,也使Western Blot技術處在風口浪尖上。因此2014年,美國國立衛生研究院提倡提高科研重現性,呼吁研究界、科學出版商、大學、工業界和其他領域推動這一變化。率先響應的期刊有Science,Cell,Nature和JBC。那讓我們來看看期刊都有哪些具體要求:

一、不建議跑平行膠,因為平行膠和剝離膜孵育體系,操作條件的不一致,影響定量的準確性,因此最好內參和目的蛋白要在同一張印跡膜上。

二、選擇寬動態范圍的方法,確認信號強度與所上樣量之間的線性關系,例如用膠片做化學發光方法的動態范圍就很窄,不建議使用。

三、強烈推薦使用總蛋白進行歸一化,因為看家蛋白容易受處理條件影響而發生變化,影響定量的結果,使用總蛋白定量更真實地反映目標蛋白表達量的變化。

四、提交原始數據,例如:JBC,PLOS和CELL等雜志都要求要提供原始數據。

Azure Sapphire多光譜激光成像系統如何滿足期刊要求

 

☑  Sapphire是多熒光檢測系統,可多達4個激光光源,同時進行4通道熒光檢測,獲得更快的工作流程和更可靠的定量數據。
☑   Sapphire配合AzureRed總蛋白熒光染色劑可以做總蛋白歸一化和定量三個靶標蛋白,生成可以信賴的定量Western Blotting數據。
☑   Sapphire配有獨特的三種檢測器設計,最大限度地提高儀器的檢測動態范圍,保證結果的準確性。☑   Sapphire提供原始數據16bit的tiff圖給到期刊,這里的tiff原始數據是指未經裁剪,像素修改,對比度調整等任何操作的圖,保證結果的真實性和可靠性。

發布者:艾普拜生物科技(蘇州)有限公司
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