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單分子免疫檢測在亨廷頓舞蹈癥生物標志物研究中的應用

瀏覽次數:2660 發布日期:2020-4-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
基因治療或可成為亨廷頓舞蹈癥治療的關鍵, mHTT蛋白成為HD最佳生物標志物

死亡之舞

亨廷頓舞蹈癥(Huntington’ s disease, HD),又名慢性進行性舞蹈癥,是一種緩慢起病的遺傳性神經退化疾病。

 

亨廷頓舞蹈癥表現為短暫不能控制的裝鬼臉、點頭、手指跳動。隨病情加重,不隨意運動惡化,出現舞蹈樣不自主運動、吞咽困難等癥狀。亨廷頓舞蹈癥通常在發病 15~20 年后死亡,對亨廷頓舞蹈病的治療目前僅限于針對癥狀的治療,沒有方法可以預防發病或減緩進展,因此國內外醫學界稱之為“死亡之舞”。

 

圖片來源:https://trypanophobia.wordpress.com/2012/10/30/darker-dancing/  

 

 

停止死亡之舞!

 

亨廷頓舞蹈癥由常染色體顯性突變引起,在亨廷頓基因(HTT)的第一個外顯子中存在CAG三核苷酸的異常重復擴增,大腦中不斷聚集突變蛋白(mHTT),最終導致神經功能失調和退化。

 

通過基因治療,靶向抑制突變CAG重復序列,抑制mHTT表達,或可成為亨廷頓舞蹈癥治療的關鍵。

 

“納米級手術刀”扭轉局面


2019年6月, Nature Medicine 發文報道,通過對轉基因tgHD小鼠的研究發現,重組AAV將ZFP-TFs遞送給原代神經元,可實現突變mHTT mRNA和mHTT蛋白降低98%以上,但對正常HTT表達沒有影響。通過腦脊液中mHTT蛋白檢測發現,mHTT蛋白呈現劑量依賴性減少,一次注射就可以使mHTT在相當長一段時間內穩定

 

2020年2月,Nature Communications 在線發文,通過重組AAV將AAV-GFAP-Cre、AAV-DIO-NeuroD1和AAV-DIO-Dlx2混合注射在紋狀體中,可將紋狀體星形膠質細胞成功轉化為神經元。

 

近期,uniQure公司宣布其基于AAV5的候選基因療法AMT-130用于治療亨廷頓病已獲得FDA研究性新藥(IND)批準,允許開始其I/II期臨床研究。

 

不治之癥或將在基因治療手中,扭轉局面。

 

mHTT蛋白成為亨廷頓舞蹈癥研究的最佳生物標志物之一

 

對亨廷頓舞蹈癥患者腦脊液中疾病相關蛋白進行定量分析,有助于監測疾病進展和評估治療干預的效果。伴隨著疾病的進展,患者腦脊液中的mHTT濃度增加;治療后mHTT蛋白濃度呈劑量性下降。mHTT蛋白成為亨廷頓舞蹈癥研究的最佳生物標志物之一。

 

病程最早期mHTT蛋白在腦脊液中濃度非常低,通常低至fg/ml級別,常規Elisa等蛋白檢測方法無法檢出這些蛋白。治療晚期檢測中,同樣也會出現這一問題。因此,在病程監控和治療效果評價中,通過超高靈敏度的蛋白檢測方法實現fg/ml低豐度表達蛋白的定量顯得尤為重要。

 

圖:SMC™超敏技術對不同年齡tgHD小型豬腦脊液中mHTT蛋白進行檢測,年齡與mHTT水平呈正相關(Molecular Therapy,2018)

 

 

默克SMC™超敏檢測實現mHTT蛋白飛克級定量

 

默克SMC™ 單分子免疫檢測平臺,可實現10 μL腦脊液中mHTT蛋白fg/ml準確定量。針對mHTT-Q45(1-573)定制開發的SMC™試劑盒最低檢測下限LOD可達0.043 pg/mL (數據來自默克R&D實驗室),滿足樣本中mHTT基線的全部檢出。

 

圖2:SMC™獨特的檢測洗脫步驟和專利的激光單分子計數技術,有效降低背景信號值,增強檢測信號,實現飛克級蛋白定量
 

產品詳情

 

經驗分享:默克SMC™ mHTT超敏試劑盒開發經驗分享

 

試劑盒的開發往往需要不斷的嘗試與經驗積累。如何開發屬于自己的SMC™超敏試劑盒,提升自有抗體對的檢測靈敏度 ?在開發SMC™超敏試劑盒的過程中,需要注意哪些事項 ? 默克CAST(customer assay R&D)團隊主管Sarah將與您分享相關話題。Sarah擁有30多年的Bio-pharm研發經驗和豐富的SMC™超敏試劑盒開發經驗。

 

Sarah將與大家分享如下話題:

  • SMC™單分子免疫檢測技術實現HTT痕量檢測的原理

  • 如何達到mHTT 和總HTT蛋白的fg/ml級定量

  • SMC™超高靈敏度試劑盒的開發與驗證

 


 



更多SMCxPRO™產品信息

https://www.sigmaaldrich.com/life-science/immunoassay-platform-solutions/single-molecule-counting.html

發布者:默克生命科學
聯系電話:400-900-3055轉8
E-mail:3538241589@qq.com

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