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人胚肺二倍體細胞操作步驟

瀏覽次數:1117 發布日期:2019-12-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
人胚肺二倍體細胞 英文名稱:CCC-HPF-1 細胞 Cell定義:能進行獨立繁殖的有膜包圍的生物體的基本結構和功能單位。一般由質膜、 細胞 質和核(或擬核)構成,是生命活動的基本單位。
人胚肺二倍體細胞操作步驟
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
發布者:上海研生實業有限公司
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