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胰島素受體-β抗體的主要使用方法

瀏覽次數(shù):1700 發(fā)布日期:2019-12-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
     胰島素是全身代謝的主要調(diào)節(jié)激素之一。這種激素的生物學作用包括碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)代謝的整合。胰島素增強葡萄糖、氨基酸和某些離子的膜轉(zhuǎn)運。它還促進糖原儲存,甘油三酯的形成和蛋白質(zhì)和核酸的合成。免疫細胞化學研究在胰島B細胞中定位胰島素。胰島素缺乏導致糖尿病,是一般人群發(fā)病率和死亡率的主要原因之一。胰島素也存在于B細胞來源的腫瘤中,如胰島素瘤。
功能:
胰島素降低血糖濃度。它增加了細胞對單糖、氨基酸和脂肪酸的滲透性。它加速糖酵解、戊糖磷酸循環(huán)和肝糖原合成。
 胰島素受體-β抗體 主要操作步驟如下:
A.a. 在進行標記之前,先選用截流分子量為20000-50000的凝膠,制備ml凝膠柱,然后分別用0倍體積的%BSA/PBS/0.02%疊氮鈉和PBS洗滌柱體,封住柱下口,備用。
B. b加入0ug純化單抗至含有25ul 2.5mol/L磷酸鈉(PH7.5)的.5ml指形管內(nèi)。隨后,加入500uCi Na25I混勻。
C. c 加入25ul新配制的2mg/ml氯胺T。室溫放置60秒。再加入50ul氯胺T終止液(含2.4mg/ml偏重亞鈉,0mg/ml酪氨酸,0%甘油和0.%環(huán)乙烷酰二甲苯的PBS  胰島素受體-β抗體 標記抗體大約在第二至第四管出現(xiàn)。無害化處理柱子和非單抗標記部分。e. 將標記單抗保存于4℃可使用6周時間。
D、d 生物合成法標記將雜交瘤細胞培養(yǎng)在含有放射性前體的培養(yǎng)基中,隨著抗體分子的合成、組裝,同位素會標記在抗體分子的初級氨基酸鏈上,本方法不會導致抗體活性的喪失。
檢測方法:熒光或著色沉淀,熒光標記物用特殊波長的光激發(fā)時發(fā)射出可見光。
發(fā)布者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:021-60443211
E-mail:3004967995@qq.com

標簽: 胰島素受體
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