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表皮生長因子對于表皮細胞生長的有利作用

瀏覽次數(shù):4503 發(fā)布日期:2019-7-3  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
     上皮細胞包括腺上皮細胞,是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養(yǎng)特別受到重視。但上皮細胞培養(yǎng)中常混雜有成纖維細胞,培養(yǎng)時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養(yǎng)關鍵。
      體內(nèi)上皮細胞生長在膠原構成的基膜,因此培養(yǎng)在有膠原的底物上可能利于生長,另外人或小鼠表皮細胞培養(yǎng)在以 3T3細胞為飼養(yǎng)層(用射線照射后)時,細胞易生長并可發(fā)生一定程度的分化現(xiàn)象。降低 PH、Ca2+含量和溫度,向培養(yǎng)基中加入表皮生長因子,均有利于表皮細胞生長。 

以表皮細胞為例,用皮膚表皮和真皮分離培養(yǎng)法可獲得純上皮細胞,其法如下:
 
1、取材:外科植皮或手術殘余皮膚小塊,早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好,取角化層薄者,切成 0.5-1平方厘米小塊。
 
2、置 0.02%EDTA中,室溫,5分鐘。
 
3、換入 0.25%胰蛋白酶中,4℃過夜。
 
4、分離:取出皮塊,用血管鉗或鑷子將表皮與真皮層分開。
 
5、取出表皮,剪成更小的塊后,置 0.25%胰酶中,37℃,30—60分鐘。
 
6、反復吹打,制成懸液。
 
7、培養(yǎng):用 80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過后,低速離心,吸去上清。
 
8、直接加入培養(yǎng)基(Eagle加 20%小牛血清)制成細胞懸液,接種入培養(yǎng)瓶,CO2溫箱培養(yǎng)。
發(fā)布者:上海一研生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-69985186
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