九叔归来3魁蛊婴在线观看_男人躁女人到高潮AV_香港成人论坛_亚洲精品久久久久久偷窥_夜来香成人网_亚洲制服 视频在线观看_无毒黄站_国产传媒18精品A片一区_麻花豆传媒剧国产MV在线观看_东北60岁熟女露脸在线_国产高清视频在线观看97_一道本视频一二三区_yellow免费播放在线观看_浪漫樱花动漫在线观看官网_高清AV熟女一区_天堂在线www_亚洲第一成年人网站_黄色在线免费观看_av女优快播_久久精品99国产精品日本

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 臍靜脈內皮細胞傳代培養方法

臍靜脈內皮細胞傳代培養方法

瀏覽次數:3918 發布日期:2018-8-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

Sciencell公司的人臍靜脈內皮細胞(貨號#8000HUVEC)是科研實驗中常用到的內皮細胞,當人臍靜脈內皮細胞達到80-90%融合時,需要對人臍靜脈內皮細胞進行傳代培養。

傳代培養方法:

1.準備培養瓶:纖維粘連蛋白(貨號#8248BPF)以2ug/cm2包被培養瓶,包被時間為37度一小時或4度過夜。將培養基(貨號#1001ECM)胰酶中和液(貨號#0113TNS)胰酶/EDTA消化液(貨號#0103、T/S)無鈣鎂離子的磷酸鹽緩沖液(貨號#0303DPBS),溫度恢復至室溫,我們不推薦用37°C水浴加熱試劑和培養基。
2.胰酶消化:棄去原培養瓶中培養基,用10mlDPBS沖洗人臍靜脈內皮細胞,然后加入2ml胰酶消化液。輕輕搖晃培養瓶以至胰酶消化液覆蓋所有人臍靜脈內皮細胞。如果使用ScienCell實驗室的胰酶/EDTA消化液,會把胰酶消化對臍靜脈內皮細胞的損害減少到最低。

3.終止消化:將培養瓶放入37度培養箱中1-2分鐘,在孵化后期,輕輕拍打培養瓶以使臍靜脈內皮細胞脫離瓶壁。顯微鏡下觀察臍靜脈內皮細胞形態變化,直至80%臍靜脈內皮細胞變圓。然后立即加入10ml胰酶中和液并輕輕搖動培養瓶。

4.細胞收集:收集人臍靜脈內皮細胞并將其轉入50ml離心管中。再加入10ml培養基沖洗培養瓶以確保收集所有的殘余臍靜脈內皮細胞。在顯微鏡下觀察培養瓶中剩余臍靜脈內皮細胞的數量以確定是否將臍靜脈內皮細胞大部分收集,剩余臍靜脈內皮細胞數應小于5%。

5.離心重懸:以1000轉/分(1000rpm)離心收取的臍靜脈內皮細胞5分鐘,棄去上清,在新加的培養基中重懸臍靜脈內皮細胞。

6.鋪板培養:對臍靜脈內皮細胞計數,然后將它們接種到新的纖維粘連蛋白包被過的培養瓶中,37度培養即可。電話13683626447

發布者:北京裕恒豐科技有限公司上海分公司
聯系電話:18211009052
E-mail:3222748508@qq.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 清远市| 正定县| 台州市| 当阳市| 沁阳市| 星子县| 黄浦区| 通州区| 东乌| 勐海县| 龙山县| 兰溪市| 阳曲县| 甘德县| 佛冈县| 和林格尔县| 莫力| 田林县| 漳浦县| 汉沽区| 浦北县| 抚松县| 阿瓦提县| 伊川县| 兰坪| 新田县| 盐山县| 冷水江市| 高清| 西平县| 陇南市| 商水县| 聂荣县| 安达市| 湘潭县| 陵水| 淳安县| 冕宁县| 时尚| 获嘉县| 高要市|