切向流過濾(TFF)系統選用標準及注意事項
瀏覽次數:68 發布日期:2025-7-9
來源:洛科/洛肯儀器
Tanfil100 TFF切向流過濾系統
選擇切向流過濾(TFF)系統的濾膜包需綜合考量分離目標、樣品特性、工藝規模及設備兼容性。以下是關鍵選配要點:
一、根據分離目標選擇膜孔徑與截留分子量(MWCO)
目標分子定位
截留目標物(如濃縮蛋白質):選擇MWCO為 目標分子量的1/3~1/5(例如目標蛋白100kDa,選30-50kDa膜包)。
透過目標物(如去除小分子雜質):選MWCO為 目標分子量的5-10倍(例如收集10kDa多肽,選50-100kDa膜包)。
分離不同分子:需確保分子量差異 ≥10倍 才能有效分離。
常見應用場景對應膜孔徑
細胞采集/澄清:0.1-0.65μm微濾膜(去除細菌、細胞碎片)。
蛋白質濃縮:10-100kDa超濾膜(如單抗、酶)。
病毒/外泌體純化:100-1000kDa超濾膜(如腺病毒、外泌體截留)。
二、膜材質選擇:兼容性與吸附性
不同材質影響回收率、耐化學性及成本:
材質類型 特點 適用場景
聚醚砜(PES) 高化學耐受性(耐酸堿、乙醇),但蛋白吸附較強 常規蛋白、多糖濃縮
再生纖維素(RC) 低蛋白吸附,適合敏感樣品,但機械強度較低 抗體、易失活蛋白
改性聚醚砜(如Omega膜) 低吸附、高回收率,可重復使用 高價值生物制品(如疫苗、治療性蛋白)
三醋酸纖維素(CTA) 親水性強,適合水相樣品 核酸、小分子脫鹽
提示:若樣品易吸附,優先選RC或表面改性膜(如Hydrosart®)。
三、膜包規格與系統匹配
有效面積與處理體積
實驗室級:選cm²膜包(如Minimate系統,可并聯個)]。
中試級:選0.09-0.46m²膜包(如Centramate系統,可并聯個)]。
通道結構與死體積
高粘度樣品:選寬流道膜包(減少堵塞)。
小體積樣品:測量系統死體積(管路+膜包內部),避免樣品損失5。
四、工藝參數與維護要求
. 操作條件適配性
高剪切敏感樣品:降低切向流速,避免分子失活]。
高固含量樣品:選用開放式流道設計,減少濃差極化]。
. 清洗與壽命
常規清洗:0.1-1M NaOH(水解蛋白)或 .M磷酸(除無機鹽)5]。
重復利用:改性PES膜(如Pall Omega膜)可耐受多次CIP(原位清洗)5]。
五、選型流程總結
明確分離目標 → 計算MWCO/孔徑 → 篩選材質 → 匹配系統規模 → 驗證清洗兼容性。
⚠️注意事項:
膜包與設備需同品牌兼容(如Pall Minimate僅兼容Omega膜);
首次使用前需預處理膜包(純水沖洗,排除保存液)。
通過綜合以上維度,可優化分離效率并降低成本。實際選型建議結合預實驗驗證膜通量及回收率。