活細(xì)胞成像應(yīng)用于藥物對(duì)血管生物學(xué)影響的研究

瀏覽次數(shù)：596　發(fā)布日期：2025-1-16　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

研究背景：
本研究介紹了一個(gè)血管表型和蛋白質(zhì)組學(xué)分析（VPT）平臺(tái)（一種用于血管生成研究的創(chuàng)新設(shè)備，可在開(kāi)放的微流體環(huán)境中培養(yǎng)內(nèi)皮層）通過(guò)使用抗血管藥對(duì)細(xì)胞骨架完整性和血管生成萌芽的影響，驗(yàn)證VPT平臺(tái)可以利用3D形態(tài)學(xué)檢測(cè)核蛋白質(zhì)分析結(jié)合，觀測(cè)萌芽數(shù)目以及藥物作用下蛋白質(zhì)的變化。VPT平臺(tái)為深入了解與細(xì)胞周期、細(xì)胞骨架、細(xì)胞衰老和血管生成相關(guān)的信號(hào)通路提供了依據(jù)，加深我們對(duì)藥物對(duì)血管生物學(xué)影響的理解，以及后續(xù)對(duì)血管以外的其他模型的蛋白質(zhì)組和核形態(tài)學(xué)特征的監(jiān)測(cè)。

血管生成的檢測(cè)方式：
血管生成的核心過(guò)程是血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成。使用活細(xì)胞成像技術(shù)，研究人員可以實(shí)時(shí)觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞如何響應(yīng)生長(zhǎng)因子的刺激，如何在組織中遷移并形成新的血管管腔。本文利用Celloger Mini Plus實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)48h內(nèi)血管形態(tài)變化。

在C通道中放入無(wú)細(xì)胞的水凝膠，更突出血管生成芽。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
利用內(nèi)皮培養(yǎng)基培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC; Lonza），培養(yǎng)2天后形成內(nèi)皮細(xì)胞單層，在C通道觀察到芽的長(zhǎng)度達(dá)到通道C的20%時(shí)，分別使用靶向抑制VEGF，VEGFR，自噬和增殖的7種藥物處理，使用Celloger Mini Plus 密切監(jiān)測(cè)藥物處理后48h內(nèi)血管的芽長(zhǎng)和芽數(shù)目的變化。

圖1.實(shí)驗(yàn)流程示意圖

圖2.不同藥物處理下血管的形態(tài)

研究人員通過(guò)Celloger Mini plus密切監(jiān)測(cè)血管的生長(zhǎng)狀態(tài)，通過(guò)成像設(shè)備發(fā)現(xiàn)貝伐珠單抗和卡博替尼治療誘導(dǎo)的變化顯示出相似的趨勢(shì)，而渥曼青霉素和紫杉醇治療顯示出顯著差異。發(fā)現(xiàn)紫杉醇具有最顯著的影響。證明形態(tài)學(xué)變化和蛋白表達(dá)差異之間的明確相關(guān)性，強(qiáng)調(diào)了細(xì)胞骨架蛋白改變和血管生成形態(tài)之間復(fù)雜相互作用。
綜上，活細(xì)胞成像是研究血管生成的核心技術(shù)，可實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀察內(nèi)皮細(xì)胞的遷移、增殖和管狀結(jié)構(gòu)形成過(guò)程，直觀揭示血管生成的動(dòng)態(tài)機(jī)制。它還能追蹤關(guān)鍵分子信號(hào)（如VEGF等）的時(shí)空分布，研究微環(huán)境對(duì)血管生成的影響，并為抗血管生成藥物篩選提供高效手段。

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