耐冷凍款細(xì)胞工廠在細(xì)胞研發(fā)工藝中的應(yīng)用
動(dòng)物用疫苗開發(fā)的工藝路線
在基于細(xì)胞培養(yǎng)的疫苗生產(chǎn)過程中，目標(biāo)產(chǎn)物留在細(xì)胞內(nèi)，需要采取措施使細(xì)胞裂解，以將產(chǎn)物釋放到細(xì)胞周圍的液體中，便于進(jìn)行后續(xù)各種產(chǎn)物純化步驟。
細(xì)胞裂解方法
成敗關(guān)鍵：細(xì)胞培養(yǎng)器皿耐冷凍性能！
機(jī)械裂解可以更均一的裂解細(xì)胞，主要采取反復(fù)凍融法。與化學(xué)裂解相比，反復(fù)凍融法具有更高的裂解效率。
反復(fù)凍融法原理：將細(xì)胞在-20攝氏度以下冰凍，室溫融解，反復(fù)幾次，由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
因熱脹冷縮的原理，細(xì)胞培養(yǎng)器皿裝入培養(yǎng)基并擰上密封蓋冷凍后，底層或頂層可能會(huì)發(fā)生輕微變形，這是一種不可避免的正常現(xiàn)象。低溫反復(fù)凍融對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)器皿的耐冷凍性能有極高的要求。
NEST細(xì)胞工廠-耐冷凍款
采用粘膠工藝
耐受-18～-20℃冷凍
抗冷凍性能★★★★★
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對(duì)NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款進(jìn)行抗冷凍性能測(cè)試。
1.取3個(gè)NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款，輻照后按200mL/層加入結(jié)晶紫溶液，擰緊密封蓋。
2.放入-18至-20攝氏度冰箱中冷凍48小時(shí)后取出。
3.待完全融化后，平放12小時(shí)、側(cè)放（4個(gè)邊分別進(jìn)行側(cè)放）各 2小時(shí)，觀察有無漏液體。
將產(chǎn)品進(jìn)行電子束輻照后,充壓8Kpa，保壓90秒，重復(fù)兩次，兩次間隔4小時(shí)以上，均無漏氣現(xiàn)象則為合格產(chǎn)品。
NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款經(jīng)密封性檢測(cè)全檢后產(chǎn)品均無滲漏。
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對(duì)NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款進(jìn)行保壓性能測(cè)試。
將產(chǎn)品進(jìn)行電子束輻照后,充壓8Kpa，保壓90秒，重復(fù)兩次，兩次間隔4小時(shí)以上，均無漏氣現(xiàn)象則為合格產(chǎn)品。
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對(duì)NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款進(jìn)行密封性能測(cè)試。
產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中會(huì)經(jīng)過密封性測(cè)試全檢，保證每個(gè)細(xì)胞工廠都擁有良好的密封性能。
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