細胞基本屬性

細胞名稱：UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)

細胞別稱：UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1

細胞類型：成纖維細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)條件：DMEM+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

細胞簡介：UMNSAH/DF-1細胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞成纖維細胞株，自發(fā)永生化。分離的原代雞胚成纖維細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，傳代直到衰老，在培養(yǎng)過程中保持細胞在30%到60%密度，不衰老的克隆進行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖，說明UMNSAH/DF-1細胞是永生化而沒有轉(zhuǎn)化。UMNSAH/DF-1細胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。

客戶養(yǎng)的UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞，現(xiàn)在是第5次傳代，這次是1:3傳代，用的是上圖胰酶1毫升，消化2一3分鐘，反饋是此次傳代的第2天很多細胞不貼壁，幫忙看一下。

小尚解答

消化時間太長了，該細胞消化時間短，注意控制消化時間及吹打力度。細胞消化至變圓可以輕松吹下時即可終止消化，不能消化至完全漂浮。對于消化這步，客戶如果對該細胞經(jīng)驗不多，無法準確掌控胰酶作用時間，建議客戶按照下述操作：

胰酶首先復溫到室溫后加入細胞，放入37度培養(yǎng)箱，然后每隔30秒，即吹打下細胞（此時吹打細胞應盡量輕柔，不能強行將細胞吹下，否則細胞可能出現(xiàn)機械損傷），如果能夠吹打散細胞，說明細胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復操作。消化完成后加3-4ML完全培養(yǎng)基終止消化，混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。傳代24h后可以觀察細胞，若死亡細胞及碎片較多建議PBS潤洗下貼壁的細胞，再加新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

2.目前細胞活力較差，死細胞偏多，建議靜置培養(yǎng)一天看一下，若明天細胞仍然不貼壁就不建議繼續(xù)培養(yǎng)了。若有保種的凍存細胞可以重新復蘇培養(yǎng)。

產(chǎn) 品

1【SNL-006】UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)

2【SNLM-006】雞胚成纖維細胞專用培養(yǎng)基

公 司 簡 介

武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖高新區(qū)光谷生物城，專注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標準化GMP實驗室、動物房，已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認證，獲得高新技術(shù)企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項榮譽。　　

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購；細胞庫凍存細胞系500余種，同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類；公司還提供人源細胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。　　

公司細胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實驗室、生物研究機構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供最優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)！尚恩生物—您專業(yè)的細胞供應商！