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人類胚胎腎細胞HEK293的分類、生長條件、細胞培養注意事項及應用

瀏覽次數:4702 發布日期:2022-8-18  來源:蘇州阿爾法生物官網
如果您完全熟悉細胞培養,您可能聽說過 HEK293 細胞。HEK293 細胞新藥實驗室 較為常用的細胞系之一。但它們是什么?為什么要使用它們?“293” 是什么意思?與HEK293T 細胞相同嗎?請繼續閱讀這些問題的答案以及更多內容。

一、什么是 HEK293 細胞?
HEK293 細胞是人類胚胎腎細胞,起初由荷蘭生物學家 Alex Van der Eb 在 1970 年代初期分離和培養。Van der Eb 實驗室的博士后 Frank Graham 用剪切的腺病毒 5 (Ad5) DNA 進行轉染 。這是他們的第 293 次實驗,所以就命名該細胞系為 HEK293 ,蓋細胞系的主要作用是通過細胞的基因改造實現重組蛋白合成。那么,HEK293T 細胞與HEK293是同一種細胞嗎?

其實,并不完全是,因為系HEK293T細胞的來源是將 SV40 大 T 抗原整合到 HEK293 基因組中——這意味著它們能夠從攜帶 SV40 復制起點的質粒載體中產生大量蛋白質。 

HEK293t

二、HEK 細胞有何優點?
使用 HEK293 細胞有很多優點。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護的細胞系,分裂迅速,大約每 36 小時可以增長 1倍。培養的細胞既能用于瞬時和穩定表達,也可懸浮培養或作為單層培養,比較容易轉染,并且能夠產生大量的 重組蛋白。

目前,HEK293 細胞主要用于癌癥研究、新藥開發、抗體蛋白生產、信號轉導和蛋白質相互作用研究等領域。

三、 HEK293 細胞的分類
HEK293 細胞已被用于創建具有特定用途的各種衍生細胞系。
表 1:HEK293 細胞的一些常用衍生物。
衍生物 特征
293-F 快速成長;懸浮生長;在無血清培養基中生長
293-H 快速成長;懸浮生長;在無血清培養基中生長;在斑塊檢測中具有良好的依從性
293T 高轉染性;包含 SV40 T 抗原
293 293-F 細胞系的衍生物;快速增長;包含 SV40 T 抗原
293E或239-EBNA1 表達 EBNA-1 蛋白
 
四、HEK293的生長條件
HEK293 細胞生長對培養環境要求不高。一般情況下維持 37°C 和 5% CO 2的加濕培養箱及充足的培養基供應即可滿足 ,為防止細菌感染,必要時可添加少許抗生素,比如:青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺等。細胞轉染方式可以建議使用HEK293 轉染試劑盒,操作方便、簡單。

HEK293細胞轉染試劑盒

五、HEK293 細胞培養注意事項
1.HEK293在進行傳代培養時,長期培養會導致細胞活力下降,所以培養代數不宜過多,通常培養的代數維持在13代以下,如果選擇的細胞系超過20代,需要需要解凍新的細胞重新開始。
2.實驗操作過程中需要注意無菌操作,避免支原體感染,同時做好定時檢測。
3.由于HEK293 細胞系的衍生物較多,所以培養時需要根據實驗選擇合適的細胞系進行培養。

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發布者:蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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