當(dāng)處理多種類型的細(xì)胞(如免疫細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞等)時(shí)，第一步是要從宿主組織中收集所需的細(xì)胞樣本。細(xì)胞分離，有時(shí)被稱為解體，涉及對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物的分解，獲得一個(gè)小細(xì)胞群體。目前，細(xì)胞分離有三種方法:機(jī)械分離法、酶解法和化學(xué)法。

機(jī)械分離

機(jī)械分離是三種方法中最簡(jiǎn)單的一種，它用物理方法分解組織，如切割、擠壓或刮擦。通常使用研缽和杵式的工具來(lái)破壞和提取樣本，獲得組織碎片。在這些碎片中，所需的細(xì)胞松散地漂浮著，從而可進(jìn)行下一步分離。
 

當(dāng)處理松散關(guān)聯(lián)的樣本時(shí)，機(jī)械分離較為有效，因?yàn)樘幚硭俣群芸臁５珯C(jī)械分離也存在穩(wěn)定性較差的問(wèn)題，每次分離獲得的細(xì)胞產(chǎn)量和存活率相差很大。這種方法常用在分離骨髓、淋巴結(jié)、脾臟和其他結(jié)合不太緊密的組織。

酶解分離

酶解分離是使用特定的蛋白酶來(lái)分解細(xì)胞組織樣品。常使用胰蛋白酶或膠原酶等酶來(lái)消化組織碎片，以釋放目標(biāo)細(xì)胞。消化酶的選取取決于組織類型， 合適的消化酶能大大加快細(xì)胞解離速率，也有利于獲得更高的細(xì)胞產(chǎn)量。
 

酶解可用于較為緊密的組織。消化酶可以減少纖維結(jié)締組織的數(shù)量，在處理肝臟等器官中可獲得更高的細(xì)胞產(chǎn)量。但這種方法較機(jī)械解離更耗時(shí)，消化酶也可能會(huì)改變靶細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)，從而改變它們的功能或影響識(shí)別。

化學(xué)分離

化學(xué)分離是利用了細(xì)胞內(nèi)鍵結(jié)合的陽(yáng)離子。陽(yáng)離子帶正電，因此添加一種與它們有親和力的化合物會(huì)導(dǎo)致組織內(nèi)的化學(xué)鍵溶解，從而達(dá)到細(xì)胞分離的目的。EDTA或依他酸等就常用于化學(xué)分離。
 

化學(xué)解離不會(huì)像酶解離那樣改變細(xì)胞表面，是一種非常安全和溫和的選擇。由于不傷害細(xì)胞，因此能保證細(xì)胞的高存活率和擴(kuò)增后的細(xì)胞數(shù)量。但化學(xué)分離法可能需要很長(zhǎng)時(shí)間，類似于酶解。化學(xué)分離影響因素較多，化學(xué)品的類型、數(shù)量、濃度和環(huán)境都會(huì)對(duì)這一過(guò)程的整體功能能力產(chǎn)生影響。這種方法通常用于胚胎細(xì)胞分離。

選擇正確的方法

在選擇細(xì)胞分離的方法時(shí)，有三個(gè)主要因素需要考慮: 分離時(shí)間、細(xì)胞量和樣本物種。就時(shí)間而言，如果樣本很大，碾壓細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn)較小，機(jī)械分離是最快最簡(jiǎn)單的方法。但如果研究的是較為罕見(jiàn)的細(xì)胞，使用化學(xué)解離等溫和的方法可能是較為合適的。最后要考慮的是分離的是什么類型的組織。其中酶解法在細(xì)胞分離中適用范圍最廣，在分離方法的首選。

必要的改進(jìn)

組織分離的最終目標(biāo)是在不影響細(xì)胞活力或功能的情況下收集盡可能多的活細(xì)胞。這需要多種方法的結(jié)合和大量的研究才能取得成功。但不同實(shí)驗(yàn)室之間的數(shù)據(jù)存在差異，以及缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的組織細(xì)胞分離方法，這是目前細(xì)胞分離研究亟待解決這些問(wèn)題。