大鼠敞箱實驗/曠場實驗方法總結

一.基本原理

動物進入敞箱后因其對新異環境的恐懼而主要在敞箱內靠周邊的區域活動，在中央區域的活動較少。然而，動物的探究特性又促使其產生在中央區域活動（包括運動、飲水或進食）的動機，因而形成沖突狀態。抗焦慮劑（如地西泮）可解除這種沖突狀態，表現為在不改變活動計數的劑量明顯增加大鼠進入敞箱中央區域的次數及在中央區域逗留的時間（Stefanski法）或增加大鼠在中央區域的飲水時間（Stout-weiss法），致焦慮劑（如FG7142）則使飲水時間明顯減少。

二.操作步驟

Stefanski法：實驗裝置為一圓形敞箱，直徑80cm，高30cm；敞箱底部中央劃有直徑分別為35cm和50cm的內外兩個圓圈，內圈所包含的區域為中央區；靠近底部的側壁上對稱裝有3個光電管，并可通過畢露電視觀察老鼠的活動情況。實驗在弱光照明、65dB的白噪聲(背景聲)下進行。實驗用雄性Wistar大鼠，體重200-240g。將大鼠置于敞箱中央，觀察10min內大鼠總的活動計數、進入敞箱外圈的次數（從敞箱周邊向中央區域運動約為15cm為一次）和在敞箱中央區域逗留的時間。

Stout-weiss法：（敞箱飲水實驗，the open field drink test，OFDT），實驗用一36cm*36cm*36cm的透明有機玻璃箱，其底部漆成黑色，頂部敞開（此實驗儀器可由上海欣軟信息科技有限公司提供）。箱子的中煙倒著懸掛一水瓶，瓶嘴離地10cm；箱的上方離地面60cm處有一25w的白熾燈用于照明。除一面外，箱體其余三面都用黑色隔板遮擋，以排除額外的的可見刺激。實驗前至少三天每天撫摸大鼠1min，以減少非特異性應激對實驗的影響；實驗前3天每天僅飲水1h（下午3：00-4:00）。實驗時將大鼠置于敞箱中央，觀察10min內大鼠開始飲水的潛伏期、飲水時間（主要指標）、靠近水瓶的次數及站立數等。

三 .注意事項與評價

（1）在每只大鼠實驗后，用5%的醋酸水溶液徹底清潔實驗箱，以防止嗅覺暗示傳遞給下一只大鼠。

 (2)敞箱實驗由于其設備簡單、操作簡便，在行為研究中使用非常普遍，多用來評價動物的運動活性等綜合行為。而作為焦慮模型只是近幾年才發展起來的，所獲得的實驗資料有限。因此，其穩定性及可靠性還有待進一步驗證，最好結合其它焦慮模型評價藥物的效應。值得注意的是，丁螺環酮盡管在其它許多模型上不敏感，但在本實驗中0.3mg/kg即有抗焦慮作用。